绒猴EBV转化的白细胞（B95-8）

绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)
细胞介绍
B95-8细胞株源自暴露于人【rén】白血球中抽提的EB病【bìng】毒的绒猴白血球。B95-8是一个连续株并释【shì】放高滴度的【de】转【zhuǎn】染EB病【bìng】毒【dú】。此细胞株提供EB病毒用于建立【lì】人的连【lián】续【xù】淋【lín】巴细胞株。
 
细胞特性
1)来源：外周血淋巴细胞
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显【xiǎn】微镜下确认细胞生长【zhǎng】状态，去掉封口膜并将T25瓶置于【yú】37°C培养2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长满（90%以上）请及时【shí】进行【háng】细胞传【chuán】代，传代培【péi】养用6ml本【běn】公司【sī】附带的*培养基【jī】。
5.接【jiē】到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污【wū】染【rǎn】或【huò】疑似污染，请【qǐng】及时与【yǔ】我们取得【dé】电联。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640: GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
培养条【tiáo】件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为【wéi】 70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管【guǎn】迅速放入【rù】37°C水【shuǐ】浴中（水面要【yào】低于【yú】冻存管盖部【bù】）摇【yáo】晃解【jiě】冻，移入事先准备【bèi】好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，加入【rù】lmL培
养基后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液【yè】移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换【huàn】液并检【jiǎn】查细胞密度【dù】。细胞【bāo】传【chuán】代：如果【guǒ】细胞密度达80%-90%，即可进行传【chuán】代培养。对于【yú】悬浮【fú】细胞，传【chuán】代可【kě】参考以下方法【fǎ】：
方法【fǎ】一【yī】：收【shōu】集细【xì】胞【bāo】，1000RPM，常温条件【jiàn】下离心【xīn】5分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
方法【fǎ】二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细【xì】胞【bāo】悬【xuán】起，将细胞悬【xuán】液按【àn】1: 2到1: 3的比例分到新【xīn】的含8ml培养基【jī】的新【xīn】皿中【zhōng】或【huò】者瓶中。细胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时【shí】，可进行细胞冻【dòng】存。悬浮细胞冻存时，应将收集，1000RPM，常温【wēn】条件下离心5分【fèn】钟【zhōng】，少量保存上【shàng】清液【yè】（防止细胞吸【xī】走)，加入【rù】部分【fèn】新鲜培养【yǎng】基，吹打均匀【yún】后，加入到冻存管中，在冻【dòng】存【cún】管中加入10%DMSO摇匀后进【jìn】行冻存。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰【bīng】己挥发【fā】干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有污染，请立即与【yǔ】我们电联。
所【suǒ】有动【dòng】物细胞均视为有潜在【zài】的生物危害性，必须在二级生【shēng】物安全台【tái】内【nèi】操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方【fāng】能【néng】丢【diū】弃【qì】。