仓鼠卵巢细胞亚株（CHO-K1）

仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)
细胞介绍
该【gāi】细胞株是源【yuán】自成年【nián】中国仓鼠卵巢深【shēn】入活体组织切片的 CHO 细胞的【de】亚克隆。
 
细胞特性
1  来源：仓鼠卵巢
2  形态 ：上皮细胞样
3  含量：>1x10 6 个/mL
4  污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5  规格：T25 瓶或者 1mL 冻存管【guǎn】包装运输和保存：使用含有【yǒu】胎牛血清【qīng】的 2ml 冻存【cún】管发送存活细胞。收到细【xì】胞后，可在 1000RPM，常温条件下【xià】，离心 5min 后【hòu】，于洁净操【cāo】作台【tái】弃去上清，加入推荐【jiàn】使用的【de】培养基后转移至【zhì】10cm 培养皿或者【zhě】 T25 培养瓶中培【péi】养【yǎng】，传【chuán】代达到【dào】细胞生长状态良【liáng】好【hǎo】时，再【zài】进行冻存。具体操【cāo】作【zuò】见细胞培养步【bù】骤。
 
仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
一． 培养基 及 培养 冻存 条件准备：
1）准备 F-12K 培养【yǎng】基（F-12K ：GIBCO），90%；胎【tāi】牛血清，10%。
2）培养【yǎng】条【tiáo】件： 气【qì】相：空【kōng】气，95%；二氧化碳【tàn】，5%。 温度：37 摄氏度，培养箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
3）冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用【yòng】现配。液氮储存【cún】。
二． 细胞 处理 ：
1） 复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻【dòng】存管在 37℃水浴【yù】中迅速摇【yáo】晃解冻，加入【rù】 4mL 培养【yǎng】基混合均【jun1】匀。在 1000RPM 条【tiáo】件下离心 4 分钟，弃去上清液，补【bǔ】加 1-2mL 培养基【jī】后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培养（或将细胞悬【xuán】液加入【rù】 10cm 皿中，加入约 8ml 培养【yǎng】基，培【péi】养【yǎng】过夜）。第二天换液【yè】并检查细【xì】胞密度。
2） 细胞【bāo】传代：如果细胞密度【dù】达【dá】 80%-90%，即可进行传代培养【yǎng】。对于贴壁细胞【bāo】，传代可参考以下方【fāng】法：
1. 弃去培【péi】养上清，用【yòng】不含钙、镁【měi】离【lí】子的 PBS 润洗细胞 9-20 次。
2. 加 2ml 消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶【píng】中，置于 37℃培养箱中【zhōng】消化 9-20 分【fèn】钟【zhōng】，然【rán】后【hòu】在【zài】显微镜下观察细胞【bāo】消化情【qíng】况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培【péi】养基【jī】终止消化【huà】。
3. 按【àn】 6-8ml/瓶【píng】补加培养【yǎng】基【jī】，轻轻打匀后吸出【chū】，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液【yè】，补【bǔ】加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞【bāo】悬液按 1：2 到 1：5 的比【bǐ】例分【fèn】到新的含 8ml 培养基的【de】新【xīn】皿【mǐn】中或者瓶中。
3）细胞冻存【cún】：待【dài】细胞生长状态良【liáng】好【hǎo】时【shí】，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养基后【hòu】加入少量胰【yí】酶，细胞变【biàn】圆【yuán】脱落后【hòu】，加入约 1ml 含血清的培养基后加入【rù】冻存管中，再添加 10%DMSO 后进【jìn】行冻存。
 
仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)注意事项：
1. 收到细胞后，若发现【xiàn】干【gàn】冰已挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立【lì】即与我们电【diàn】联。
2. 所【suǒ】有动物【wù】细胞【bāo】均视为有潜在的生物危【wēi】害性，必须在二级【jí】生物安全台【tái】内操作【zuò】，并请注意防护，所有废【fèi】液及【jí】接触过此【cǐ】细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。