经典型霍奇金淋巴瘤细胞（L428）

经典型霍奇金淋巴瘤细胞(L428)
细胞特性
1)来源：淋巴，淋巴瘤
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在【zài】显微镜下确认细胞生长状态【tài】，去掉【diào】封口膜【mó】并将T25瓶【píng】置于37°C培养约【yuē】2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行【háng】细胞传代，传代培养【yǎng】用6ml本公司附带的【de】*培【péi】养基。
5.接到细胞次【cì】日【rì】，请【qǐng】检【jiǎn】查细胞是否【fǒu】污染，若发现污染或疑似【sì】污染，请及时与我们取【qǔ】得电联【lián】。
 
经典型霍奇金淋巴瘤细胞(L428)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPMI-1640:GIBC)，90%;胎牛血清，10%。
培养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。冻存【cún】液：90%血清，10%DMSO，现【xiàn】用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含【hán】有lmL细【xì】胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水面【miàn】要低于冻【dòng】存【cún】管盖【gài】部）摇晃解冻，移【yí】入事先准备【bèi】好的含有4mL培养基的15ml离【lí】心管中【zhōng】混合【hé】均匀。在1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心4分钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培养基后【hòu】吹匀。然后将所有【yǒu】细胞【bāo】悬【xuán】液移入含有5ml培养基的培【péi】养瓶中培养过夜。第二天换【huàn】液并检查细胞密度。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可【kě】进行【háng】传【chuán】代【dài】培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常【cháng】温条【tiáo】件下离心5分钟，弃去上【shàng】清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹【chuī】句，将【jiāng】细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培【péi】养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
方法二：可选择半【bàn】数换液方式，弃去半数【shù】培养基【jī】后，将剩余细胞【bāo】悬起，将细胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 3的比例【lì】分到新的【de】含【hán】8ml培养基的新皿中或【huò】者瓶中【zhōng】。细胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态良好时【shí】，可【kě】进【jìn】行细胞冻存。悬浮细胞冻存【cún】时，应【yīng】将【jiāng】细胞收【shōu】集，1000RPM，常温条件下【xià】离心5分钟，少量保存上【shàng】清液（防止细胞吸走)，加入部【bù】分新鲜培养【yǎng】基，吹打【dǎ】均匀后，加入到【dào】冻存管中，在冻【dòng】存【cún】管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
 
经典型霍奇金淋巴瘤细胞(L428)注意事项：
收到【dào】细胞后，若【ruò】发现干【gàn】冰己挥发【fā】干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有【yǒu】污染，请立即与我们电【diàn】联。
所有动物【wù】细胞均视为有潜【qián】在【zài】的生物危害【hài】性，必须在二级生物安全台【tái】内操作，并请注意防【fáng】护，所有废液及【jí】接触过此细【xì】胞【bāo】的器皿【mǐn】需要灭菌后方能【néng】丢弃。