非小细胞肺癌细胞（H1792）

非小细胞肺癌细胞(H1792)
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下【xià】确【què】认细胞生长状【zhuàng】态【tài】，去掉封【fēng】口膜并将T25瓶置于37°C培【péi】养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长满（90%以上）请及【jí】时【shí】进【jìn】行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的*培养【yǎng】基【jī】。
5.接【jiē】到细胞【bāo】次日，请【qǐng】检【jiǎn】查细【xì】胞是否污染，若发现污【wū】染或疑【yí】似污染，请及时与【yǔ】我们取得电联。
 
非小细胞肺癌细胞(H1792)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基（RPMI-1640，GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温【wēn】度：37°C，培养【yǎng】箱湿度为【wéi】 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的【de】冻存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃【huǎng】解冻，移【yí】入事先准【zhǔn】备好的含有4mL培【péi】养基的15ml离心管中混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃去【qù】上【shàng】清液，加入【rù】lmL培养基后吹匀。然【rán】后将【jiāng】所有细胞悬【xuán】液【yè】移入【rù】含有5ml培【péi】养基的培养【yǎng】瓶中培【péi】养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞【bāo】密度达【dá】80%-90%，即可【kě】进行【háng】传【chuán】代【dài】培养。对于贴壁细胞，传【chuán】代可参【cān】考以下方法：弃去培养上清，用【yòng】不含【hán】钙、镁离子的【de】PBS润洗细胞9-23次。力口 2m丨消【xiāo】化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于37°C培养【yǎng】箱中【zhōng】消化【huà】9-23分钟，然后【hòu】在显微镜【jìng】下观【guān】察细【xì】胞消化情【qíng】况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿【ná】回操【cāo】作台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加【jiā】入3ml此细胞的培【péi】养基终【zhōng】止消化【huà】。轻轻吹【chuī】打【dǎ】后吸出，移入15ml离【lí】心【xīn】管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备【bèi】好的含【hán】有5ml培养基的T-25培养瓶中或含【hán】有14ml培基【jī】的【de】T-75培养瓶【píng】中培养【yǎng】。细胞冻存：待【dài】细【xì】胞生长【zhǎng】状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存时，先要消化处【chù】理【lǐ】并进行细胞计数。消化方法按照细胞【bāo】传代方法的9-23步骤进行，后的重【chóng】悬液使用血清。悬【xuán】浮细胞直接计数后离心，用血【xuè】清重悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入【rù】DMSO后迅速【sù】混匀【yún】，按每lml的【de】数量分配到冻存【cún】管中。本公司按【àn】每个【gè】冻存管细胞数目大【dà】于1X106个细胞冻存。
 
非小细胞肺癌细胞(H1792)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶【píng】盖脱【tuō】落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立即与【yǔ】我【wǒ】们电联。
所【suǒ】有【yǒu】动物细胞均视为有潜【qián】在的生物危害【hài】性，必须在二级生【shēng】物安全台【tái】内操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接触【chù】过【guò】此细【xì】胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。