非洲绿猴SV40转化的肾细胞（C0S-7）

非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)
细胞介绍
此细【xì】胞株源自CV-1细胞株，经带【dài】有编码野生型T抗原的起始失活【huó】突【tū】变【biàn】的SV40转【zhuǎn】染得到。
 
细胞特性
1)来源：非洲绿猴肾
2)形态：成纤维细胞，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显【xiǎn】微镜下确认【rèn】细【xì】胞【bāo】生长状态，去【qù】掉封口膜并将T25瓶置于37°C培【péi】养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满【mǎn】（90%以上）请及时【shí】进【jìn】行细胞【bāo】传代，传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检【jiǎn】查细胞【bāo】是否污【wū】染，若发现【xiàn】污染或疑似污染，请及时与【yǔ】我们【men】取【qǔ】得电联。
 
非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基【jī】(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养【yǎng】条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度【dù】为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的冻存管迅速【sù】放入37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】（水面要低于冻存管盖部）摇【yáo】晃【huǎng】解冻，移入事先【xiān】准备好【hǎo】的含有4mL培养基【jī】的【de】15ml离心管中混合【hé】均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入【rù】lmL培养基后吹【chuī】匀。然【rán】后【hòu】将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中【zhōng】培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。细【xì】胞【bāo】传代【dài】：如【rú】果细胞密度达80%-90%，即可进行传【chuán】代培养。对于【yú】贴壁细胞，传代【dài】可【kě】参【cān】考以【yǐ】下方法：弃去培养【yǎng】上清【qīng】，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-23次。力口 2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-23分钟，然后在显微镜【jìng】下【xià】观【guān】察细胞【bāo】消【xiāo】化情况，若细胞大部分变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的【de】培养基终止消【xiāo】化。轻【qīng】轻吹打后吸【xī】出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀【yún】。移入【rù】到事先准备【bèi】好的【de】含有5ml基的T-25培养瓶中或含有14ml培【péi】养【yǎng】基【jī】的T-75培养瓶中培【péi】养。细胞冻存【cún】：待细胞生长状【zhuàng】态【tài】良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要消化【huà】处【chù】理并进行【háng】细胞【bāo】计数。消化【huà】方法【fǎ】按照细胞传代【dài】方法的9-23步【bù】骤进行，后的重悬液使用血清。悬【xuán】浮细胞直接计数【shù】后离心【xīn】，用血【xuè】清重悬【xuán】浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每【měi】lml的数量分配到冻存管中。本【běn】公司按每个冻【dòng】存管细胞数【shù】目大于1X106个细胞冻存【cún】。
 
非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥【huī】发干净、冻【dòng】存管瓶盖【gài】脱落、破损及【jí】细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立即与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视为有【yǒu】潜在的生物危害【hài】性，必【bì】须在二级生【shēng】物安全【quán】台【tái】内操作，并请注【zhù】意防【fáng】护，所有废液及接触过此细胞的器【qì】皿需要灭菌后方能【néng】丢弃。