仓鼠肺细胞（CHL）

仓鼠肺细胞（CHL)
细胞介绍
该细胞广泛应用于染色体异常测试。。
 
细胞特性
1)来源：中国仓鼠肺
2)形态：成纤维细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装【zhuāng】运输和保存：可选择干冰运输及发送【sòng】复苏存活细胞方式：（1)干冰运输【shū】，收到后立即转入液【yè】氮【dàn】冻存或直接复【fù】苏【sū】；（2)存活细胞【bāo】，收到【dào】后应【yīng】继续生【shēng】长，传代达到【dào】细胞生长状【zhuàng】态良好时，再进行冻存。具【jù】体操作见细胞培【péi】养步骤。
 
仓鼠肺细胞（CHL)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。或者：DMEM培养基(GIBCO,添【tiān】加【jiā】NaHC031.5g八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气相：空气【qì】，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度【dù】，培【péi】养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液氮储存【cún】。
  
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻【dòng】，加【jiā】入4mL培养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜（或将细胞【bāo】悬【xuán】液加入l〇cm皿中【zhōng】，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜【yè】）。第【dì】二天换液并检查细胞密度。细胞传【chuán】代：如果细胞【bāo】密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞【bāo】，传代可参考以下方法：弃【qì】去培养上清，用不含钙【gài】、镁离子的【de】PBS润洗细胞9-23次。力【lì】口【kǒu】 2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于【yú】37°C培养箱中消化9-23分钟，然后【hòu】在显微【wēi】镜下【xià】观察细【xì】胞消【xiāo】化【huà】情况若细胞大部变【biàn】圆并脱落，迅速拿回【huí】操【cāo】作台，轻【qīng】敲【qiāo】几【jǐ】下培养瓶后【hòu】加少【shǎo】量培养基终止按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻打匀后【hòu】吸出【chū】，在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到【dào】新的含【hán】8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良【liáng】好时【shí】，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，弃去培养基后加入【rù】少量【liàng】胰酶【méi】，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含【hán】血【xuè】清【qīng】的培养基【jī】后加入冻存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行【háng】冻存。
 
仓鼠肺细胞（CHL)注意事项：
收到【dào】细胞后，若【ruò】发现干冰【bīng】己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有污染，请即与我们电【diàn】联。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜在的生【shēng】物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并【bìng】请注意防【fáng】护【hù】，所有废液及接触过【guò】此细【xì】胞【bāo】的器皿【mǐn】需要灭菌后【hòu】方能丢弃。