人胃癌前细胞（GES-1）

人胃癌前细胞(GES-1)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM-H 培养基【jī】(DMEM-H:GIBCO, 添【tiān】加 NaHC031.5g八【bā】)，90%;胎牛【niú】血清，10%。PS:1%。
2.培【péi】养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现【xiàn】配【pèi】。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液【yè】的【de】冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入【rù】4mL培【péi】养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然【rán】后将所有细胞悬【xuán】液加入培【péi】养【yǎng】瓶【píng】中培养过夜【yè】（或【huò】将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基【jī】，培养过夜）。第二天换液并检查【chá】细【xì】胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃癌前细胞(GES-1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不【bú】含钙、镁【měi】离子的PBS润洗细【xì】胞【bāo】9-22次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-22分【fèn】钟，然后在显微【wēi】镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分【fèn】变圆并【bìng】脱【tuō】落，迅速拿【ná】回操作台，轻【qīng】敲【qiāo】几下培养瓶后加少【shǎo】量培养基终【zhōng】止消【xiāo】化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上【shàng】清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀【yún】。将细胞悬【xuán】液按【àn】1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。
 
3)细【xì】胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时【shí】，可【kě】进行细胞冻存。贴壁【bì】细【xì】胞冻存时，弃去培【péi】养基后加【jiā】入少【shǎo】量胰【yí】酶【méi】，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含【hán】血清的培养基后【hòu】加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
注意事项：
收到细胞后【hòu】，若【ruò】发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱【tuō】落、破【pò】损【sǔn】及细胞有污染【rǎn】，请立【lì】即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞【bāo】均视【shì】为有【yǒu】潜【qián】在的生物危害性，必须在二级生【shēng】物安全台内操作，并请注意防【fáng】护，所【suǒ】有废液及接【jiē】触过此【cǐ】细胞【bāo】的器皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胃
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃癌前细胞(GES-1)运输和保存：使用含有胎牛【niú】血清的【de】2ml冻存【cún】管发送存【cún】活细胞。收【shōu】到细胞后， 可在1000RPM，常【cháng】温条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净操【cāo】作台弃【qì】去上【shàng】清【qīng】，加入推荐 使用的培养基后转移【yí】至l〇cm培【péi】养皿或者T25培养【yǎng】瓶中培养，传代达到细胞生【shēng】长【zhǎng】 状【zhuàng】态良好时，再进行【háng】冻存。具体操作【zuò】见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。