人舌鱗癌细胞（Tca-8113）

人舌鱗癌细胞(Tca-8113)
细胞介绍：
Tca-8113源自属于I级鳞癌(T2NlAmo, II stage)的原【yuán】位舌癌的活组织检查切片【piàn】。通过干贴壁方法建立【lì】于1987年，传【chuán】代时间为38小时。传代【dài】第三【sān】天有丝【sī】分裂指数为61%，移植效【xiào】率为86%，软琼脂【zhī】克隆率为9-19.7%。ATS处理后【hòu】在【zài】ICR和C57B1
小鼠中成瘤。电镜和组化特征与鳞癌相符。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八【bā】, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸【suān】钠【nà】O.llg八)，80%;胎牛血清，20%。
2. 培养【yǎng】条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱【xiāng】湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基【jī】，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞【bāo】悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速【sù】摇【yáo】晃解【jiě】冻，加入4mL培养基混【hún】合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然后【hòu】将所有细胞悬【xuán】液加入【rù】培养瓶【píng】中【zhōng】培养过夜【yè】（或将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过【guò】夜）。第【dì】二天换液并检【jiǎn】查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用【yòng】不含钙【gài】、镁离子的【de】PBS润洗细胞9-19次。力【lì】口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置【zhì】于37°C培养箱中消【xiāo】化【huà】9-19分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消【xiāo】化情【qíng】况，若【ruò】细胞大部分变圆并脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加少【shǎo】量培【péi】养基终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞悬液【yè】按【àn】1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好【hǎo】时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞【bāo】冻【dòng】存时【shí】，弃去培【péi】养基后【hòu】加入【rù】少量胰【yí】酶，细胞变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清【qīng】的培养基后加入冻【dòng】存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污【wū】染，请立【lì】即与我们电联。
所有动物细胞均【jun1】视为有潜【qián】在的【de】生物危【wēi】害性，必须在二【èr】级生物安全台【tái】内操作，并请【qǐng】注意防护【hù】，所有废液及接触过【guò】此细胞的器皿需【xū】要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：舌癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)运输和保存【cún】：使【shǐ】用含有胎牛血【xuè】清的2ml冻【dòng】存管【guǎn】发送存【cún】活【huó】细胞【bāo】。收到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常【cháng】温条件下，离心5min后【hòu】，于洁净操作台弃去上清，加入【rù】推荐使用【yòng】的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细【xì】胞生长状态良好【hǎo】时，再进【jìn】行【háng】冻【dòng】存。具体操作见细胞培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。