罗猴胎肾细胞（MA-104）

罗猴胎肾细胞(MA-104)
细胞介绍
MA 104细胞衍生于【yú】罗【luó】猴胎肾。细胞对猴轮状病毒【dú】（Simian rotavirus SA11)高度【dù】敏感。可用于【yú】很多病毒【dú】的增殖。
 
细胞特性
1)来源：罗猴胚胎肾
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：可【kě】选择干冰运【yùn】输及发【fā】送【sòng】复苏存活细胞方式【shì】：（1)干冰运【yùn】输【shū】，收到【dào】后立即转入液氮冻存或直【zhí】接复【fù】苏；（2)存活细胞【bāo】，收到后应【yīng】继续生长，传代达【dá】到【dào】细胞生长状【zhuàng】态【tài】良好时，再进【jìn】行存。具【jù】体操作见细胞培养步骤。
 
罗猴胎肾细胞(MA-104)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八D-葡萄糖2.5g八，丙【bǐng】酮【tóng】酸钠O.llg八)，85%;胎牛血清，15%。
2.培养条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度【dù】：37摄【shè】氏度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入【rù】4mL培养【yǎng】基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加入【rù】培养瓶中培【péi】养过夜（或将细胞液加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基，培养过【guò】夜）。第二【èr】天换液并【bìng】检查【chá】细胞密【mì】度【dù】。细胞【bāo】传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代【dài】培养。弃去培养上清，用不含钙、镁【měi】离子的PBS润【rùn】洗细【xì】胞9-23次【cì】力【lì】口【kǒu】 2m丨消化【huà】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱【xiāng】中消【xiāo】化9-23分钟，然后在显微【wēi】镜【jìng】下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回操【cāo】作台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养【yǎng】基【jī】，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例【lì】分到【dào】新的含8ml培养基【jī】的新皿中或者瓶中【zhōng】。
细胞冻【dòng】存【cún】：待细胞生长状态【tài】良【liáng】好时，可【kě】进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去【qù】培养基后【hòu】加入少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基【jī】后加入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
罗猴胎肾细胞(MA-104)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥【huī】发干【gàn】净、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有【yǒu】污【wū】染，请立【lì】即与我们电【diàn】联。
所【suǒ】有动【dòng】物【wù】细胞均视为【wéi】有潜在的生【shēng】物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并请注意【yì】防护，所有废液【yè】及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭【miè】菌【jun1】后方能丢弃。