绵羊肺细胞（OAR-L1）

绵羊肺细胞(OAR-L1)
细胞介绍：
该细胞系【xì】来源【yuán】于一雌性【xìng】绵羊的肺组【zǔ】织。1990年由中国科学院昆明【míng】细胞库建立。
 
细胞特性
1)来源：绵羊肺
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜【jìng】下确【què】认细【xì】胞生长状态【tài】，去掉封口膜并将【jiāng】T25瓶置于【yú】37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞【bāo】长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细【xì】胞传代，传代培养用6ml本公司【sī】附带的*培养【yǎng】基。
5.接【jiē】到细胞次日，请检查细胞是否污染【rǎn】，若发现污【wū】染【rǎn】或疑似污染，请及【jí】时与我们【men】取得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。

绵羊肺细胞(OAR-L1)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 McCOY's 5A 培养【yǎng】基(McCOY's 5A，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气相【xiàng】：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放【fàng】入【rù】37°C水浴中【zhōng】（水面要低于【yú】冻存管盖部）摇【yáo】晃解冻，移【yí】入事先准备好的含【hán】有4mL培养基的15ml离心管中混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清液，加入lmL培【péi】
养基后【hòu】吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬【xuán】液移入含有5ml培养基【jī】的培【péi】养瓶中【zhōng】培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙【gài】、镁离【lí】子的PBS润洗【xǐ】细胞9-23次。力口 2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中【zhōng】消化9-23分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察【chá】细胞消化情【qíng】况，若细胞大部
分变圆并脱落【luò】，迅速拿回【huí】操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养【yǎng】瓶后【hòu】加入3ml此细胞的培养基终止消化。轻轻【qīng】吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟【zhōng】，弃去【qù】上清液，加入lmL培养液【yè】后吹【chuī】匀。
移入到事先准备好的含有5ml培养【yǎng】基的T-25培养【yǎng】瓶中【zhōng】或含有【yǒu】14ml培养基的T-75培养瓶中【zhōng】培养【yǎng】。
 
细【xì】胞【bāo】冻存：待【dài】细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时【shí】，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁【bì】细胞冻存时，先要消化处理并进【jìn】行细胞计数。消【xiāo】化方法【fǎ】按照细胞传代方法的9-23步骤进【jìn】行，后的【de】重悬液使用血清。悬【xuán】浮【fú】细胞直【zhí】接【jiē】计数后离心，用血清重悬浮【fú】，加DMSO
至终【zhōng】浓度为【wéi】10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分【fèn】配到冻存管中。本公【gōng】司【sī】按每个冻存管细【xì】胞数目大于1X106个细胞冻【dòng】存【cún】。
 
绵羊肺细胞(OAR-L1)注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现【xiàn】干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损及细【xì】胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视为有潜在的生物【wù】危【wēi】害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞【bāo】的【de】器皿需【xū】要灭菌【jun1】后方能【néng】丢【diū】弃。