人胰腺癌细胞（Capan-1）

人胰腺癌细胞(Capan-1)
细胞介绍：
该细【xì】胞来源于【yú】一位40岁白人男性患【huàn】者的肝转移。细【xì】胞表达粘液素，Rh+，HLA A2,，A9，B13，B17。含有刺激素受体和【hé】乙二醇激素【sù】受体。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备IMDM培养基（IMDM，GIBCO，80%;北美胎牛血 清(United States，GIBCO，货号16000-044)，20%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳【tàn】，5%。温度：37°C，培养【yǎng】箱湿度 为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面要低 于冻存管【guǎn】盖部）摇晃解冻，移入事先准备好【hǎo】的【de】含有4mL培养【yǎng】基【jī】的【de】15ml离【lí】心管中混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，加入lmL培 养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养【yǎng】基的培养瓶中【zhōng】培养【yǎng】过夜。第【dì】二天换液并【bìng】检查【chá】细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胰腺癌细胞(Capan-1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-23次【cì】。力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养【yǎng】箱中消化9-23分钟，然后在【zài】显微镜下观察细胞【bāo】消化情况，若【ruò】细胞大部 分变【biàn】圆并脱落【luò】，迅速【sù】拿回【huí】操作台，轻敲几下培养【yǎng】瓶【píng】后【hòu】加入3ml此细胞的 培养【yǎng】基终止消化【huà】。轻轻吹【chuī】打【dǎ】后【hòu】吸出，移【yí】入15ml离心管【guǎn】中，在1000RPM条件下离心4分钟， 弃【qì】去上清液，加入lmL培养液后吹匀【yún】。移入到事先准备好的含有5ml培养【yǎng】基【jī】的T-25培养【yǎng】瓶中或含【hán】有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
 
3)细胞冻存：待细【xì】胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存。贴【tiē】壁细胞【bāo】冻存时，先要消【xiāo】化处理【lǐ】并【bìng】进行【háng】细胞计数。消化方法按照【zhào】细胞传代方法【fǎ】的9-23步骤进行，后的重【chóng】悬液使用【yòng】血【xuè】清。悬浮细【xì】胞直【zhí】接计数后离心，用血清重悬浮，加【jiā】DMSO至终浓度为10%。加入【rù】DMSO后迅速混匀，按【àn】每lml的【de】数量【liàng】分配到冻存管【guǎn】中。本公司按每个【gè】冻存管细胞数【shù】目大于1X106个细【xì】胞冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若【ruò】发现干冰【bīng】己挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染【rǎn】，请【qǐng】立即【jí】与我们电联。
所有动【dòng】物【wù】细胞【bāo】均视为【wéi】有【yǒu】潜在的生物危【wēi】害性，必【bì】须在二级生物安全台内操作，并请注意【yì】防【fáng】护，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胰腺癌，肝转移
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胰腺癌细胞(Capan-1)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下【xià】确认细胞生长【zhǎng】状态，去掉封【fēng】口【kǒu】膜并将【jiāng】T25瓶【píng】置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长满（90%以上）请及时【shí】进行【háng】细胞传【chuán】代，传【chuán】代【dài】培养用6ml本公司附带的*培养基。
5.接【jiē】到【dào】细胞次【cì】日，请检【jiǎn】查细胞是否污染，若发现污染或【huò】疑似污染，请及时与我们取【qǔ】得电联。
细胞用途：仅供使用。