人肺癌细胞（NCI-H2126）

人肺癌细胞(NCI-H2126)
细胞特性：
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输【shū】和保存【cún】：使用含有胎牛【niú】血清的2ml冻【dòng】存管【guǎn】发【fā】送【sòng】存活细【xì】胞【bāo】。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后【hòu】，于洁净【jìng】操作台弃去上清，加入推荐使用【yòng】的培养基【jī】后转【zhuǎn】移【yí】至【zhì】l〇cm培养【yǎng】皿或者T25培养【yǎng】瓶中培养，传代达细胞生长【zhǎng】状态良好时，再进行冻【dòng】存。具体操作见细【xì】胞培养步骤。
 
细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F12 培养【yǎng】基(DMEM/F12，GIBCO)，85%;胎牛血清，5%，添加5ug/mL胰【yí】岛素，0.01mg/mL转铁蛋白【bái】，lOnMe-雌二醇，2mML-谷氨酰胺【àn】。
2.培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度【dù】为70%-80%。
3. 冻存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现【xiàn】配。液氮【dàn】储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻存管在【zài】37°C水浴中迅【xùn】速摇晃解【jiě】冻【dòng】，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液【yè】加入培养瓶【píng】中培养过夜（或将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基，培【péi】养过夜）。第二天换液并检查细胞【bāo】密度。细胞【bāo】传代：如果【guǒ】细【xì】胞【bāo】密度达80%-90%，即可【kě】进【jìn】行【háng】传代培【péi】养。
 
人肺癌细胞(NCI-H2126)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-23次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置于【yú】37°C培养箱中消化9-23分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消【xiāo】化【huà】情【qíng】况，若【ruò】细胞大部分变圆并脱【tuō】落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几【jǐ】下培养瓶【píng】后加少量培养基终止消【xiāo】化。
按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上【shàng】清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将【jiāng】细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养【yǎng】基的【de】新皿中或者【zhě】瓶中。
 
细【xì】胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进【jìn】行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去【qù】培【péi】养基【jī】后加入少量胰酶【méi】，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的【de】培养基后加入冻【dòng】存【cún】管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻【dòng】存。
 
人肺癌细胞(NCI-H2126)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己挥【huī】发干净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请【qǐng】立即【jí】与【yǔ】我们电联【lián】。
所有动【dòng】物细胞均视为有潜在【zài】的生物危害【hài】性，必须在【zài】二级生物安全台【tái】内操作，并请注意防护，所有废液【yè】及接【jiē】触【chù】过【guò】此细胞【bāo】的器皿需【xū】要灭菌后【hòu】方能丢弃。