人胃腺癌细胞（SGC-7901）

人胃腺癌细胞(SGC-7901)
细胞介绍：
这株细胞源自一位56岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO1)，90%;胎牛血清，10%。
2.培【péi】养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱 湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在【zài】37°C水浴【yù】中迅速摇【yáo】晃解冻【dòng】，加入【rù】4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将【jiāng】所有【yǒu】细胞【bāo】悬液【yè】加入培养瓶【píng】中培养过夜（或【huò】将【jiāng】细【xì】胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查【chá】细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃腺癌细胞(SGC-7901)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上清，用【yòng】不含【hán】钙、镁【měi】离【lí】子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次。力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化【huà】9-21分钟，然后在显微镜下观察【chá】细胞消【xiāo】化情况，若细胞【bāo】大部分变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回【huí】操作台，轻敲几【jǐ】下培【péi】养瓶后加【jiā】少【shǎo】量培养【yǎng】基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打【dǎ】匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。将细【xì】胞悬【xuán】液【yè】按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的【de】新皿中或者瓶中【zhōng】。
细胞冻存：待细胞【bāo】生【shēng】长【zhǎng】状态良好时，可【kě】进【jìn】行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去【qù】培养基【jī】后加【jiā】入少【shǎo】量胰酶，细胞【bāo】变【biàn】圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后加【jiā】入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破【pò】损及【jí】细胞有污染，请【qǐng】立即与我们电【diàn】联。
所【suǒ】有【yǒu】动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二【èr】级【jí】生物安全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注意【yì】防护【hù】，所【suǒ】有废液及【jí】接触过此细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃腺癌细胞(SGC-7901)运输和保存：使用含有胎牛血清的【de】2ml冻存管发送存活【huó】细【xì】胞。收到【dào】细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离【lí】心5min后【hòu】，于洁净操作台弃去上清，加入【rù】推【tuī】荐使用【yòng】的培【péi】养基后转移至l〇cm培养【yǎng】皿【mǐn】或【huò】者T25培养瓶中培【péi】养，传代达到细【xì】胞生长 状态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作【zuò】见细【xì】胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。