人舌鱗癌细胞（SCC-9）

人舌鱗癌细胞(SCC-9)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F12 培【péi】养基(DMEM/F12，GIBCO)，90%;胎牛血清。
2.培【péi】养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱【xiāng】湿【shī】度为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻【dòng】，加入4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然【rán】后将所【suǒ】有【yǒu】细胞悬液【yè】加入培养【yǎng】瓶【píng】中培养过夜（或将细胞悬【xuán】液加入【rù】l〇cm皿【mǐn】中，加【jiā】入约8ml培【péi】养基，培养过夜）。第二天【tiān】换液并检【jiǎn】查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 

人舌鱗癌细胞(SCC-9)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清【qīng】，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次【cì】。力【lì】口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养【yǎng】箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下观【guān】察【chá】细【xì】胞消化情况，若【ruò】细胞大部【bù】分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻【qīng】敲几下【xià】培养瓶后加少量培养基终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养【yǎng】基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟，弃去【qù】上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新【xīn】的含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶【píng】中。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细【xì】胞冻【dòng】存时，弃 去【qù】培养基后加入【rù】少【shǎo】量胰酶，细【xì】胞【bāo】变圆脱落后，加入约lml含血清【qīng】的【de】培养基后 加入冻【dòng】存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后【hòu】，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破【pò】损及细胞有污染，请【qǐng】立即与【yǔ】我们电联。
所有动物【wù】细胞均视为有潜在的生物危害性，必【bì】须在二级生物安【ān】全台内操作，并请注意防【fáng】护【hù】，所有废液及接触【chù】过【guò】此细胞的器皿需要【yào】灭菌【jun1】后【hòu】方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：舌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 

人舌鱗癌细胞(SCC-9)运输和【hé】保存：使【shǐ】用【yòng】含有胎牛血清【qīng】的2ml冻存管发【fā】送存【cún】活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条【tiáo】件【jiàn】下【xià】，离心【xīn】5min后，于【yú】洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至l〇cm培养【yǎng】皿或者T25培养瓶中培【péi】养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行【háng】冻存【cún】。具体操作见细胞【bāo】培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。