人B淋巴细胞瘤细胞（RAMOS）

人B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)
细胞介绍：
该细胞来源于一位3岁的白人Burkitt淋巴【bā】瘤患【huàn】者；EBV阴性；表达【dá】IL-4受体和低【dī】亲【qīn】和性IgE受体（CD23);分泌【mì】IgM (lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。 

本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基【jī】（RPMI-1640，GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
培养【yǎng】条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培【péi】养箱湿度【dù】为70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的【de】冻存【cún】管【guǎn】迅【xùn】速放【fàng】入37°C水浴中【zhōng】（水面要低于冻存管【guǎn】盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液【yè】，加入【rù】lmL培养基【jī】后【hòu】吹匀。然后将所有【yǒu】细【xì】胞悬液移【yí】入【rù】含有5ml培养基的培【péi】养瓶中【zhōng】培养【yǎng】过夜【yè】。第二天换液并检【jiǎn】查细胞密【mì】度。

人B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法【fǎ】一：收【shōu】集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹句，将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例【lì】分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换【huàn】液方式【shì】，弃去半数培养基后，将【jiāng】剩余【yú】细【xì】胞【bāo】悬起，将细 胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将【jiāng】细胞收【shōu】集，1000RPM，常【cháng】温【wēn】条【tiáo】件下离【lí】心5分钟，少量保存上清液【yè】（防止细胞吸走【zǒu】)，加入部分新【xīn】鲜【xiān】培养基【jī】，吹【chuī】打均匀后，加【jiā】入到冻存管中，在冻存管中加【jiā】入10%DMSO摇匀后进【jìn】行冻【dòng】存。

注意事项：
收到【dào】细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干【gàn】净、冻【dòng】存管【guǎn】瓶盖脱【tuō】落、破损及细胞有污染【rǎn】，请立【lì】即与我们电联。
所有动物【wù】细胞均【jun1】视【shì】为【wéi】有潜在的生【shēng】物危害性，必【bì】须在二级【jí】生物【wù】安全台内【nèi】操作，并请注意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 

细胞特性：
1)来源：血液
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

人B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确认细胞【bāo】生长状态【tài】，去掉封【fēng】口膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养【yǎng】约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长满（90%以上）请及时【shí】进行细胞【bāo】传代，传代【dài】培养【yǎng】用6ml本公司附带的*培【péi】养基【jī】。
5.接到细【xì】胞次日【rì】，请检查细胞是【shì】否【fǒu】污染【rǎn】，若发现污染或【huò】疑似污染【rǎn】，请【qǐng】及时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。