淋巴瘤细胞 （Raji）

淋巴瘤细胞 (Raji)
细胞介绍：
淋巴母细胞样的Raji细胞株【zhū】源自【zì】一【yī】位11岁黑人男孩【hái】的【de】左上颌骨的Burkitt淋巴瘤。EBNA阳性。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清【qīng】，10%。
2.培养条【tiáo】件：气相【xiàng】：空【kōng】气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养【yǎng】基，10%DMSO,现用现配。液氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解冻，加入【rù】4mL培养【yǎng】基混合【hé】均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀【yún】。然后将所有细【xì】胞【bāo】悬液加入培【péi】养【yǎng】瓶【píng】中培养过夜（或将细【xì】胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 

淋巴瘤细胞 (Raji)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用【yòng】不含钙、镁离【lí】子的【de】PBS润洗细【xì】胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分【fèn】钟，然后【hòu】在显微镜下【xià】观【guān】察细胞【bāo】消化情况，若细胞大【dà】部【bù】分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养基，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件下【xià】离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的【de】含【hán】8ml培养【yǎng】基的新皿中或【huò】者瓶中。 

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心【xīn】4分钟，弃【qì】去上清液，补加【jiā】l-2mL 培养液后【hòu】吹匀，将【jiāng】细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方【fāng】法【fǎ】二：可选择半数【shù】换液方式，弃去【qù】半数【shù】培养基后【hòu】，将剩余细胞悬起，将【jiāng】细 胞悬液按1: 2到1: 3的比【bǐ】例分到新的【de】含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 

细胞冻存【cún】：待细【xì】胞【bāo】生【shēng】长状【zhuàng】态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后【hòu】加入少【shǎo】量胰【yí】酶，细胞变圆脱落后【hòu】，加入约lml含血清的【de】培养【yǎng】基后【hòu】 加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细【xì】胞收集，1000RPM条件下【xià】离心4分钟，少量保存上【shàng】清液（防止细胞【bāo】吸【xī】走)，加 入部分【fèn】新鲜培养基，加入到冻存【cún】管【guǎn】中，在【zài】冻存管中加入【rù】1〇%DMSO后进行冻存。 

注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发现【xiàn】干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及【jí】细【xì】胞【bāo】有污染，请【qǐng】立即与我们【men】电联。
所有动物细胞均视为有潜在【zài】的生物危害性【xìng】，必须在二【èr】级生物安【ān】全台内【nèi】操作，并【bìng】请注【zhù】意防【fáng】护，所有废液及接触过此细【xì】胞的器【qì】皿需要灭菌后方能丢弃。 

细胞特性：
1)来源：B淋巴细胞;Burkitt淋巴瘤
2)形态：淋巴母细胞
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
淋巴瘤细胞 (Raji)运输【shū】和保【bǎo】存：可选择干冰【bīng】运【yùn】输及【jí】发送复【fù】苏存活细胞方式：（1)干冰运输，收到【dào】后【hòu】立即转入液氮冻存或直【zhí】接复苏；（2)存活细【xì】胞，收【shōu】到后【hòu】应继续生长，传【chuán】代达到细胞生长状态良好时【shí】，再进行冻【dòng】存。具体【tǐ】操作见细胞【bāo】培养步骤。

细胞用途：仅供使用。