人肝细胞 （QSG-7701）

人肝细胞 (QSG-7701)
细胞介绍：
该细胞系来自35岁女性的肝癌癌旁组织。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;北美胎牛血【xuè】清(United States，GIBCO)，10%。

2. 培养条【tiáo】件：气【qì】相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬【xuán】液的冻【dòng】存管迅速放入37°C水浴中【zhōng】（水面要【yào】低于冻【dòng】存管盖部【bù】）摇晃解冻，移入事先准备好的含【hán】有4mL培养基的【de】15ml离心【xīn】管中混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，加入lmL培养基后吹匀。然【rán】后将【jiāng】所有细胞悬【xuán】液移入含有【yǒu】5ml培【péi】养【yǎng】基的培养瓶中培养过夜。第二天【tiān】换液【yè】并检查【chá】细胞密度。

细胞传代：如果细胞 密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肝细胞 (QSG-7701)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不【bú】含钙、镁离子的【de】PBS润【rùn】洗细胞9-21次。力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟，然后在显微【wēi】镜下【xià】观察细胞消化情况，若细胞大【dà】部分变【biàn】圆并脱落，迅速【sù】拿回操【cāo】作台，轻敲几下培【péi】养【yǎng】瓶后【hòu】加入3ml此细胞【bāo】的培养【yǎng】基终止消化。轻轻吹打【dǎ】后吸出，移入15ml离【lí】心管中，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液【yè】，加【jiā】入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备好的含【hán】有5ml培养【yǎng】基的【de】T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养基【jī】的【de】T-75培养瓶中培养。 

细胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细【xì】胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，先要消【xiāo】化处理【lǐ】并进行细胞计数。消【xiāo】化方法【fǎ】按【àn】照细胞传代方法的9-21步骤进行，后的【de】重悬液使用【yòng】血清。加DMSO至终浓【nóng】度为10%。加入DMSO后【hòu】迅【xùn】速混匀，按【àn】每lml的数量分配【pèi】到冻【dòng】存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

 注意事项：收到细胞后，若发现干冰己挥【huī】发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱【tuō】落、破损及细胞有【yǒu】污染【rǎn】，请立【lì】即与我们电联【lián】。

所有动物细胞均视为有【yǒu】潜【qián】在的生物危害【hài】性，必须在二【èr】级生物安全台内操作【zuò】，并请注意防【fáng】护，所有废【fèi】液及【jí】接触过此【cǐ】细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 细胞特性：
1)来源：肝脏
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肝细胞 (QSG-7701)运输和保存：可【kě】选【xuǎn】择干冰运【yùn】输【shū】及发送【sòng】复苏存活细胞方式：（1)干【gàn】冰运输，收到后【hòu】立即【jí】转入液氮冻存或直接复苏；（2)存活细胞，收到后【hòu】应【yīng】继续生长，传代达到细胞生【shēng】长状态良好【hǎo】时，再进【jìn】行【háng】冻存。具体操作见细【xì】胞培养步骤【zhòu】。

细胞用途：仅供使用。