人卵巢癌细胞（0VCAR-3）

人卵巢癌细胞(0VCAR-3)
细胞介绍：
0VCAR-3细胞由T.C.Hamilton在1982年建系。取于患进行【háng】性卵巢【cháo】腺癌病人的恶【è】性腹水【shuǐ】。MH-0VCAR-3是研究卵【luǎn】巢癌药【yào】物抗性的【de】一个合适【shì】的模【mó】型系统且由于存在激素受体，这对【duì】于【yú】激素治疗【liáo】的评估【gū】或许是有用的。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，添加 0.01 毫克/毫【háo】升牛胰岛素，80%;胎牛血清，20%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏【shì】度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用现【xiàn】配【pèi】。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细【xì】胞【bāo】悬液的冻【dòng】存管在37°C水浴中【zhōng】迅【xùn】速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清【qīng】液，补【bǔ】加l-2mL培养基后吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液【yè】加入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或将细胞悬【xuán】液加入l〇cm皿中【zhōng】，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人卵巢癌细胞(0VCAR-3)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清【qīng】，用不【bú】含钙、镁【měi】离子的PBS润洗细胞9-21次【cì】。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱【xiāng】中消化【huà】9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速拿回【huí】操【cāo】作台【tái】，轻敲【qiāo】几【jǐ】下培养瓶后加少量培【péi】养【yǎng】基【jī】终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻【qīng】打匀后【hòu】吸出【chū】，在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液【yè】按1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶【píng】中【zhōng】。

 
细胞冻存：待细胞生长状态良好时【shí】，可进【jìn】行细胞冻存【cún】。贴壁细胞【bāo】冻存时【shí】，弃去培【péi】养基后【hòu】加入少量【liàng】胰酶，细胞变圆脱落【luò】后，加【jiā】入约lml含血清的培养基后加入冻【dòng】存管中，再【zài】添加【jiā】1〇%DMSO后【hòu】进行冻【dòng】存。

 
注意事项：
收【shōu】到细胞【bāo】后，若【ruò】发现干冰【bīng】己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请立即【jí】与我【wǒ】们电联。
所有动物细胞均视【shì】为有【yǒu】潜在【zài】的生物危害性【xìng】，必须在二级生物安全【quán】台内操作，并请注【zhù】意防护，所有废液及接触【chù】过此细【xì】胞的器【qì】皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：卵巢
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人卵巢癌细胞(0VCAR-3)运输【shū】和保存：使用含【hán】有【yǒu】胎牛血清的2ml冻存【cún】管发送【sòng】存活细胞。收【shōu】到细胞后【hòu】，可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心4min后，于洁净操作台弃【qì】去【qù】上清，加入推荐使用的培【péi】养基【jī】后转移至l〇cm培养皿【mǐn】或【huò】者T25培养瓶中培养，传代【dài】达【dá】到细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。