人肾癌细胞（0S-RC-2）

人肾癌细胞(0S-RC-2)
细胞介绍：
细胞来源于日本人的肾脏肿瘤细胞，可以移植到裸鼠。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄【táo】糖2.5g八，丙酮酸【suān】钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。

2.培【péi】养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温【wēn】度【dù】：37摄氏度，培养箱 湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞【bāo】悬液【yè】的冻【dòng】存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液加【jiā】入培【péi】养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。

 
人肾癌细胞(0S-RC-2)细胞传代【dài】：如果细胞【bāo】密度达80%-90%，即可进行传【chuán】代培养。弃去培养上清，用不【bú】含钙【gài】、镁离子的PBS润【rùn】洗细【xì】胞【bāo】9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培【péi】养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部 分变【biàn】圆并脱落【luò】，迅速拿回【huí】操作台【tái】，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加【jiā】少【shǎo】量培养【yǎng】基终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去【qù】上清液，补加l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到【dào】新【xīn】的【de】含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 
细胞冻存：待细胞生长状态【tài】良【liáng】好时，可进行【háng】细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存时，弃去培养基后加【jiā】入少量胰酶【méi】，细胞变【biàn】圆脱落后【hòu】，加入【rù】约lml含【hán】血清的培养基后加【jiā】入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后【hòu】进行【háng】冻存【cún】。

 
注意事项：
收【shōu】到细胞后【hòu】，若发【fā】现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破【pò】损【sǔn】及细胞有污染，请立即与我【wǒ】们电联。
所有动物细胞均【jun1】视【shì】为有【yǒu】潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操作，并请注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及接【jiē】触过【guò】此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：肾
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肾癌细胞(0S-RC-2)运输【shū】和保存：可选择干冰运输【shū】及发送复苏存活【huó】细【xì】胞方式：（1)干冰【bīng】运输，收到后 立即【jí】转入【rù】液氮【dàn】冻存或直接复苏；（2)存活细【xì】胞，收到后【hòu】应【yīng】继续生【shēng】长，传代达到细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养步骤【zhòu】。

细胞用途：仅供使用。