人肺鱗癌细胞（NCI-H1703）

人肺鱗癌细胞(NCI-H1703)
细胞介绍：
该细胞【bāo】1987年建系，源【yuán】自一位54岁患有非小细【xì】胞肺癌的白【bái】人男性，该患【huàn】者为吸烟者【zhě】。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，85%;胎【tāi】牛【niú】血清，15%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%培养基，10%DMSO，现用现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解【jiě】冻【dòng】，加入4mL培【péi】养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀【yún】。然后将【jiāng】所有细胞悬液加入培【péi】养瓶中培养过夜【yè】（或将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肺鱗癌细胞(NCI-H1703)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养【yǎng】瓶【píng】中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-22分钟，然后在【zài】显【xiǎn】微镜下观察细【xì】胞消化情况【kuàng】，若细【xì】胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回【huí】操作【zuò】台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化【huà】。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培【péi】养基，轻轻打【dǎ】匀后吸出，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去【qù】上清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹【chuī】匀【yún】。将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的【de】新皿【mǐn】中或【huò】者瓶中。

 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长状态良【liáng】好时，可进【jìn】行细【xì】胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存【cún】时，弃【qì】去培养基后加入少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加【jiā】入约lml含【hán】血清【qīng】的培养基后加入【rù】冻存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存【cún】。

 
注意事项：
收到【dào】细胞后【hòu】，若发现干【gàn】冰【bīng】己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视为有潜在【zài】的【de】生【shēng】物危害性，必须在二【èr】级生【shēng】物安【ān】全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接触【chù】过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肺鱗癌细胞(NCI-H1703)运输【shū】和保存：使用含有【yǒu】胎牛血清的2ml冻【dòng】存【cún】管发送存活细胞【bāo】。收到细胞【bāo】后，可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于【yú】洁净操作台弃去上清【qīng】，加入【rù】推荐【jiàn】使用的培养【yǎng】基后转移至【zhì】l〇cm培养皿【mǐn】或【huò】者T25培养瓶中培养，传代达到细胞【bāo】生【shēng】长状态良好时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。