人子宫颈表皮癌细胞（MS751）

人子宫颈表皮癌细胞(MS751)
细胞介绍：
这【zhè】株细胞是Sykes于1974年建立的（参【cān】考ATCC HTB-33)。有【yǒu】报告称MS751细胞含有状瘤18 (HPV-18)序列。后来发现【xiàn】MS751细胞包含HPV-45基因组的【de】一部分，而其【qí】中E6/E7区域表达【dá】呈poly(A)+RNA的形式【shì】。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培【péi】养【yǎng】基(MEM, GIBCO,添【tiān】加NaHC03 1.5g八，丙酮酸【suān】 钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬【xuán】液【yè】的冻【dòng】存管在37°C水浴【yù】中迅速【sù】摇【yáo】晃解冻，加入4mL培【péi】养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀【yún】。然后将所有细胞悬液加入培【péi】养瓶中培养【yǎng】过夜【yè】（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入【rù】约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人子宫颈表皮癌细胞(MS751)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不含钙、镁【měi】离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-22次。力口2m丨【shù】消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培【péi】养箱【xiāng】中消化9-22分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部【bù】分变【biàn】圆【yuán】并【bìng】脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养【yǎng】基终止【zhǐ】消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养【yǎng】基，轻轻【qīng】打匀【yún】后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀。将细【xì】胞【bāo】悬【xuán】液【yè】按1: 2到1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿【mǐn】中或【huò】者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长状态良好时【shí】，可进行细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存时，弃去培养基【jī】后加入少【shǎo】量胰酶【méi】，细胞【bāo】变圆脱落【luò】后【hòu】，加入约lml含血【xuè】清【qīng】的培养基后【hòu】 加入冻存管中【zhōng】，再【zài】添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。

 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现【xiàn】干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污染【rǎn】，请立即与我们电【diàn】联。
所有动物【wù】细胞均【jun1】视为【wéi】有潜在的【de】生物危害性【xìng】，必须在二级生物安全台内操作，并【bìng】请注意防护，所【suǒ】有废液及接触过此【cǐ】细胞【bāo】的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：宫颈表皮样癌淋巴结转移灶
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人子宫颈表皮癌细胞(MS751)运输和【hé】保【bǎo】存：可选择干冰运【yùn】输及发【fā】送复苏【sū】存活细胞方式：（1)干冰运输【shū】，收到后【hòu】立即转入液氮【dàn】冻存或直接复苏；（2)存活【huó】细胞

，收到后应继【jì】续生长，传代达到细【xì】胞生长状态【tài】良【liáng】好时，再进【jìn】行冻存。具体操【cāo】作见细胞培【péi】养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。