人胃癌细胞 （MGC-803）

人胃癌细胞 (MGC-803)
 
细胞介绍：
从一位53岁男性原发性胃低分化粘液样腺癌患者建立。
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八, D-葡萄糖【táng】2.5g八【bā】，丙酮酸钠O.llg八【bā】)，90%;胎牛血清，10%。

2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二【èr】氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅【xùn】速摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培【péi】养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基【jī】后【hòu】吹匀。然后将所【suǒ】有细胞【bāo】悬液加入培养【yǎng】瓶中培养过【guò】夜【yè】（或将细胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃癌细胞 (MGC-803)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培【péi】养上清，用【yòng】不含钙、镁离子的【de】PBS润洗【xǐ】细胞9-22次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于【yú】37°C培【péi】养【yǎng】箱中消化9-22分钟，然后【hòu】在显【xiǎn】微镜下观【guān】察细【xì】胞消化情况，若细胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养【yǎng】瓶后加少量培养基终【zhōng】止 消化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离【lí】心【xīn】4分【fèn】钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬【xuán】液【yè】按【àn】1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶【píng】中。

细【xì】胞冻【dòng】存：待细胞生长【zhǎng】状态良好时【shí】，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，弃去培养基【jī】后加入少量胰【yí】酶，细【xì】胞变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清的培养基后加入冻【dòng】存管中，再【zài】添【tiān】加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。

 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞【bāo】有污染，请立即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜在【zài】的生【shēng】物危【wēi】害性【xìng】，必须【xū】在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有【yǒu】废液及接【jiē】触过此细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃癌细胞 (MGC-803)运【yùn】输【shū】和保【bǎo】存：使用【yòng】含有胎牛血清【qīng】的2ml冻存管发【fā】送存活细胞。收到细【xì】胞后，可在1000RPM，常温【wēn】条件下，离心5min后，于洁净【jìng】操作【zuò】台弃去上【shàng】清，加入推荐使用的培养基后转移【yí】至l〇cm培养皿或者T25培养瓶【píng】中培养，传代【dài】达到细胞生【shēng】长 状态良【liáng】好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。