人ruxian癌细胞（MDA-MB-361）

人ruxian癌细胞(MDA-MB-361)
细胞介绍：
该细胞源自40岁女性ruxian癌的脑转移组织。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】L-15培养【yǎng】基(L-15:GIBCO)，80%;胎牛血清【qīng】，20%。
2. 培【péi】养条件：气相：空气，100%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中【zhōng】迅速摇晃【huǎng】解【jiě】冻，加 入【rù】4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹匀。然后将所有细胞悬液【yè】加入【rù】培养【yǎng】瓶中培【péi】养过夜【yè】（或将细胞悬液加入【rù】l〇cm皿【mǐn】中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-361)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力口【kǒu】2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-22分钟，然【rán】后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部分变圆并脱落【luò】，迅速拿回【huí】操【cāo】作【zuò】台，轻敲几下【xià】培养瓶后加【jiā】少量【liàng】培【péi】养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到【dào】新的含【hán】8ml培养基【jī】的新皿【mǐn】中或者瓶【píng】中。

 
细胞冻存【cún】：待细胞生【shēng】长状态良【liáng】好时，可【kě】进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养基后加【jiā】入少量胰酶，细胞变圆脱【tuō】落后，加入约lml含血清的培【péi】养基后加入【rù】冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻【dòng】存。

 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发【fā】现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有【yǒu】污染，请立即与我们【men】电联。
所【suǒ】有动物【wù】细胞【bāo】均视为有潜在【zài】的生物危【wēi】害性，必须在二【èr】级生物安全台内操作，并请注意【yì】防护，所有废【fèi】液及接触过此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：ruxian癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-361)运输和保存：使用含有【yǒu】胎牛血清的【de】2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离【lí】心【xīn】5min后【hòu】，于【yú】洁净操作台弃去上清，加入推荐使【shǐ】用的培养基后转移至l〇cm培养皿或【huò】者T25培养【yǎng】瓶中培【péi】养，传代达【dá】到细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。