人ruxian癌细胞（MDA-MB-231）

人ruxian癌细胞(MDA-MB-231)
细胞介绍：
MDA-MB-231是从一名51岁的白人【rén】女性ruxian癌【ái】患者的胸水【shuǐ】中分【fèn】离【lí】建立的。该【gāi】细胞表达表皮生长因子【zǐ】EGF受体、TGF- a受体和WNT7B

癌基因。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM-H 培【péi】养基(DMEM-H，GIBCO,添加 NaHC031.5g/L)， 90%;胎【tāi】牛血清，10%。（DMEM 液【yè】体培养基：

GIBCO，11995-065)。
2.培养条件：37摄氏度气相：空气，100%。
3. 冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细【xì】胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存【cún】管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解冻，加【jiā】入【rù】4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心【xīn】4分钟，

弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然后【hòu】将所有细胞悬液【yè】加入培【péi】养【yǎng】瓶中培养过夜【yè】（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加【jiā】入约【yuē】8ml

培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-231)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用不含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-22次【cì】。力口2m丨消【xiāo】化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置【zhì】于37°C

培养箱【xiāng】中【zhōng】消【xiāo】化9-22分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回【huí】操【cāo】作【zuò】台，轻敲几【jǐ】下培养【yǎng】瓶后加

少量【liàng】培养【yǎng】基【jī】终止【zhǐ】 消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养【yǎng】基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养

液后吹匀【yún】。将【jiāng】细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例分到新【xīn】的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进行【háng】细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培【péi】养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加【jiā】入【rù】

约lml含血清【qīng】的培【péi】养基【jī】后加入冻【dòng】存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发【fā】现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有污染，请立【lì】即与【yǔ】我们【men】电【diàn】联。
所有动物细【xì】胞均视【shì】为有潜在的生物危害性，必须在二级【jí】生【shēng】物安【ān】全台内操【cāo】作，并请注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器皿需

要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：ruxian癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(MDA-MB-231)运输和【hé】保存：使用T25瓶充液发送活细胞。收【shōu】到【dào】细胞后，请【qǐng】先在显微镜下检【jiǎn】查细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态，并将T25瓶置于【yú】培养【yǎng】箱约6h或过夜【yè】

后，再次检查细胞状态。若状态良【liáng】好，可按照以下细【xì】胞【bāo】培养步骤【zhòu】进行细【xì】胞【bāo】后续处理操【cāo】作。若发现可疑污【wū】染物，请及【jí】时与我们取

得电联。
细胞用途：仅供使用。