人ruxiian癌细胞（MCF-7）

人rux癌细胞(MCF-7)
细胞介绍：
MCF-7细胞保留了多个分【fèn】化了的ruxian上皮的特性【xìng】，包括：能通过胞质雌激【jī】素受【shòu】体【tǐ】加工雌【cí】二醇并能形成【chéng】圆【yuán】形复合物（domes)。该细胞含有Tx-4癌【ái】基【jī】因【yīn】。肿瘤坏【huài】死【sǐ】因子ct(TNF alpha)可以抑制MCF-7细【xì】胞的【de】生长。抗雌激素处理细胞能调变IGFBP'S 的分泌。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1. 准备MEM培养基(MEM，GIBCO,添加NaHC031.5g八，丙酉同酸钠【nà】O.llg八，0.01mg/ml牛胰岛素)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。

2.培养【yǎng】条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄【shè】氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在【zài】37°C水浴中【zhōng】迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培【péi】养基混合【hé】均匀。在1000RPM条件下离【lí】心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有【yǒu】细胞悬液加入培【péi】养瓶中【zhōng】培养【yǎng】过夜（或将 细【xì】胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入【rù】约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

 
人rux癌细胞(MCF-7)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上【shàng】清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力【lì】口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置【zhì】于【yú】37°C培养箱中【zhōng】消化9-22分钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况，若细【xì】胞【bāo】大部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回【huí】操作台，轻敲【qiāo】几下培养【yǎng】瓶后加少量培养基终止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃去【qù】上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培养【yǎng】基的新皿【mǐn】中【zhōng】或者瓶【píng】中【zhōng】。

 
细胞冻【dòng】存：待【dài】细【xì】胞生长状态【tài】良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去【qù】培养基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱【tuō】落后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基后 加入【rù】冻存管中【zhōng】，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。

 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰【bīng】己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及细【xì】胞【bāo】有污染，请立【lì】即与我们电联。
所【suǒ】有动物【wù】细胞均视为有潜在的生物危【wēi】害性，必须【xū】在【zài】二【èr】级生物安全【quán】台内【nèi】操作，并请注意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：腺癌，ruxian，胸水
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人rux癌细胞(MCF-7)运输【shū】和保【bǎo】存：可【kě】选择干冰运【yùn】输及【jí】发送复苏【sū】存活细胞方式：（1)干【gàn】冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直【zhí】接【jiē】复苏；（2)存【cún】活细胞

，收到后应继续生长【zhǎng】，传代达到【dào】细胞【bāo】生长状态【tài】良【liáng】好时，再进行冻存。具体操作见【jiàn】细【xì】胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。