人神经胶质瘤细胞（LN-18）

人神经胶质瘤细胞(LN-18)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 DMEM-H 培【péi】养基【jī】(DMEM-H，GIBCO,添加 NaHC031.5g/L)， 90%;胎【tāi】牛血清，10%。（DMEM 液体【tǐ】培养基：GIBCO，11995-065)。

2.培养条【tiáo】件【jiàn】：气相【xiàng】：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴中迅速摇晃解【jiě】冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上【shàng】清液，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液加入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或将【jiāng】细胞悬【xuán】液加入【rù】l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。

细胞传代：如 果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人神经胶质瘤细胞(LN-18)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培【péi】养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于【yú】37°C培【péi】养箱中消化9-22分【fèn】钟【zhōng】，然后在显微镜下观察【chá】细【xì】胞消化情况，若细胞大【dà】部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后【hòu】加少量培养基【jī】终止消化【huà】。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分 钟，弃去【qù】上清【qīng】液【yè】，补加l-2mL培养液后吹匀。将【jiāng】细【xì】胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比例【lì】分到【dào】新的【de】含8ml培养基【jī】的新皿中或者瓶中。

 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
细胞冻存【cún】：待细胞生【shēng】长状态良好时，可进行【háng】细【xì】胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存时，弃 去培养基【jī】后加入少量胰酶，细胞【bāo】变【biàn】圆【yuán】脱【tuō】落后，加入约【yuē】lml含血清的培养基【jī】后【hòu】 加【jiā】入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。

 
注意事项：
收到细胞后【hòu】，若【ruò】发现【xiàn】干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破【pò】损及细【xì】胞有污染，请立即与我们电联。
所【suǒ】有【yǒu】动【dòng】物【wù】细胞均视为有潜在的【de】生物危害【hài】性，必【bì】须在二级生物安全【quán】台【tái】内操作【zuò】，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：神经胶质瘤细胞
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人神经胶质瘤细胞(LN-18)运【yùn】输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清的2ml冻【dòng】存管【guǎn】发送存活【huó】细胞。收【shōu】到【dào】细胞后， 可在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后，于洁净【jìng】操【cāo】作台弃【qì】去上清，加【jiā】入推荐使用【yòng】的【de】培养基后【hòu】转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长 状态【tài】良【liáng】好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。