T细胞淋巴瘤细胞 （Karpas299）

T细胞淋巴瘤细胞 (Karpas299)
细胞介绍：
该细胞系为间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
培养条件：气【qì】相：空【kōng】气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存【cún】管【guǎn】迅速放【fàng】入【rù】37°C水浴中（水面【miàn】要低于【yú】冻存管【guǎn】盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心【xīn】管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上清【qīng】液，加入lmL培 养基后【hòu】吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养【yǎng】基的培【péi】养瓶中培养过夜。第二天【tiān】换液并检查细胞密度【dù】。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
T细胞淋巴瘤细胞 (Karpas299)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集【jí】细胞【bāo】，1000RPM，常温【wēn】条件下离心5分钟，弃去上清【qīng】液，补加 l-2mL培养【yǎng】液后吹句，将细胞悬液【yè】按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新的含8ml培 养基的新皿中或者瓶中。

方法二【èr】：可选择半数换【huàn】液【yè】方式，弃【qì】去半【bàn】数培养基后，将剩余细胞悬起，将【jiāng】细【xì】胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到【dào】新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细【xì】胞【bāo】冻【dòng】存【cún】：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存【cún】。悬浮细胞冻【dòng】存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离【lí】心5分钟【zhōng】，少【shǎo】量保存上清【qīng】液（防止细胞吸【xī】走)，加入部【bù】分新鲜【xiān】培养【yǎng】基，吹打均匀后，加入到冻【dòng】存管中，在冻【dòng】存管 中加【jiā】入10%DMSO摇匀后进行冻【dòng】存。

 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现【xiàn】干冰己挥发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细【xì】胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视为有潜【qián】在的生物危害性，必须在二【èr】级生物安全台【tái】内操作，并请注意防护，所有废液【yè】及接触过【guò】此【cǐ】细胞的器皿【mǐn】需【xū】要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：淋巴瘤
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
T细胞淋巴瘤细胞 (Karpas299)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜【jìng】下确认细胞生【shēng】长状态，去掉【diào】封口【kǒu】膜【mó】并将T25瓶置于37°C培养【yǎng】约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满（90%以【yǐ】上）请及【jí】时进行细胞传代，传代【dài】培养用6ml本公司附【fù】带的【de】*培养基【jī】。
5.接到细【xì】胞次日，请检查细胞是【shì】否污染，若发现污染或【huò】疑似污染，请及时与我【wǒ】们取得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。