人慢性髓系白血病细胞 （K562）

人慢性髓系白血病细胞 (K562)
细胞介绍：
该细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细【xì】胞【bāo】性【xìng】白血【xuè】病【bìng】急【jí】变期的【de】女性患者【zhě】的胸水中分离建立的。该细【xì】胞曾被认为来源于粒系，处于高【gāo】度未分化阶【jiē】段；Anderson 等人作了【le】细胞膜特性【xìng】的研究【jiū】后，认为该【gāi】细胞是红白血病细胞系【xì】。该细胞【bāo】是对自然 杀伤【shāng】细胞高度敏感的体外靶【bǎ】标，故而被广泛应用于这方面【miàn】的研究。K562的原始【shǐ】 细胞是一【yī】种【zhǒng】具有【yǒu】多向分化潜能【néng】的造血系统的【de】恶性【xìng】肿【zhǒng】瘤细胞，能自发分化为红系【xì】、粒【lì】系和单核系的可辨识的祖细胞【bāo】。该细胞表【biǎo】达CD7(25 % )。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清%。

2.培【péi】养条【tiáo】件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入【rù】4mL培养基【jī】混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加入培养瓶【píng】中培养【yǎng】过【guò】夜（或将 细胞【bāo】悬液加【jiā】入【rù】l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人慢性髓系白血病细胞 (K562)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方【fāng】法一：收集细胞，1000RPM条件下离【lí】心4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹匀【yún】，将细胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换【huàn】液方【fāng】式【shì】，弃去【qù】半数培养【yǎng】基后，将剩余细胞悬【xuán】起，将细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到1: 3的比例分到新的【de】含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 
细【xì】胞冻【dòng】存：待细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，可进【jìn】行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细【xì】胞收集，1000RPM条件【jiàn】下离心4分【fèn】钟【zhōng】，少量保上清液（防【fáng】止细胞吸走)，加【jiā】入【rù】部分新【xīn】鲜培养【yǎng】基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行【háng】冻存。

注意事项：
收到【dào】细胞【bāo】后【hòu】，若发现【xiàn】干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细胞有污染，请立即与【yǔ】我们【men】电联。
所有动物细胞均视【shì】为有潜在的【de】生【shēng】物【wù】危害性【xìng】，必须在二级生物安全台【tái】内操作，并请注意防护，所有废【fèi】液【yè】及接触过此细胞【bāo】的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。

 
细胞特性：
1)来源：骨髓
2)形态：淋巴母细胞样；圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人慢性髓系白血病细胞 (K562)运输和保存：使用含【hán】有胎牛血清的2ml冻存管发送【sòng】存【cún】活细胞。收到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常【cháng】温【wēn】条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推【tuī】荐使用的培养基后【hòu】转移【yí】至【zhì】l〇cm培养皿或【huò】者T25培养【yǎng】瓶中培养，传代【dài】达到【dào】细胞生长状【zhuàng】态【tài】良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。