人膀胱移行细胞癌细胞 （J82）

人膀胱移行细胞癌细胞 (J82)
细胞介绍：
电【diàn】子显微镜下可观察【chá】到数【shù】目【mù】不同的【de】粗面内质网和突出【chū】微丝。含raMH-ras)癌基因。 
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养基(MEM，GIBCO，添【tiān】加NaHC031.5g八，丙酮 酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养【yǎng】箱湿度【dù】为70%-80%。
3. 冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存【cún】管在37°C水浴中迅速摇晃解【jiě】冻【dòng】，加入【rù】4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜【yè】（或将【jiāng】细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人膀胱移行细胞癌细胞 (J82)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不【bú】含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-20次。力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培【péi】养瓶中，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-20分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大部 分变【biàn】圆并脱落【luò】，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养瓶后【hòu】加少【shǎo】量培养基终止消化【huà】。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻轻【qīng】打匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到【dào】1: 5的【de】比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新【xīn】皿中或者瓶中。

 
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态【tài】良【liáng】好【hǎo】时，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃【qì】去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱【tuō】落【luò】后，加入约lml含【hán】血清的培养基后加入冻存【cún】管【guǎn】中，再添【tiān】加【jiā】1〇%DMSO后进行【háng】冻存。

 
注意事项：
收到细胞后，若发现【xiàn】干冰己挥发干【gàn】净、冻存【cún】管瓶盖脱【tuō】落、破损【sǔn】及细胞有污【wū】染【rǎn】，请立即与我【wǒ】们电联。
所有动【dòng】物【wù】细胞均【jun1】视为有潜在【zài】的【de】生【shēng】物危害性【xìng】，必【bì】须在【zài】二级生物安全台内操作，并请注意防【fáng】护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃瓶中。 

细胞特性
1)来源：膀胱移行细胞癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人膀胱移行细胞癌细胞 (J82)运【yùn】输和【hé】保存：使用【yòng】含【hán】有胎牛血清的2ml冻存管发送存【cún】活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离【lí】心5min后，于洁【jié】净操【cāo】作台弃去上清，加入推荐使【shǐ】用【yòng】的培养基【jī】后转移至l〇cm培养皿或【huò】者【zhě】T25培养瓶中培【péi】养【yǎng】，传代达到细胞生长【zhǎng】状态良好时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。