人ruxian癌细胞（Hs578T）

人ruxian癌细胞(Hs578T)
细胞介绍：
Hs 578T细胞株源自乳房癌。它【tā】与正常成【chéng】纤维细胞样细【xì】胞【bāo】株Hs 578Bst起【qǐ】源于同【tóng】一位患者。HS578T细胞株初是多角形的【de】，但在传代过程中【zhōng】选择并克【kè】隆了星形的细【xì】胞【bāo】形态【tài】。电镜下观【guān】察到酪蛋白颗粒【lì】聚集，桥粒，紧【jǐn】密【mì】连接【jiē】，脂质体和光滑内质网小泡。与Hs578Bst—样，未检测到雌激素受体和内生。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM 培养基(DMEM，GIBCO,添加 NaHC031.5g八，添加0.01mg/ml牛胰岛素)，90%;胎牛【niú】血【xuè】清，10%。

2.培养条【tiáo】件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存【cún】管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解冻，加【jiā】入【rù】4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬【xuán】液加入培养瓶【píng】中培【péi】养过【guò】夜（或将细胞悬液【yè】加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人ruxian癌细胞(Hs578T)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用【yòng】不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞【bāo】9-22次【cì】。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-22分【fèn】钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情【qíng】况【kuàng】，若细胞【bāo】大部 分变【biàn】圆并脱落，迅速【sù】拿回操作【zuò】台，轻敲几下培养瓶后加少量【liàng】培养基终止【zhǐ】消化【huà】。按6-8ml/瓶【píng】补【bǔ】加培养基，轻【qīng】轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹【chuī】匀。将细【xì】胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的【de】含8ml培养基【jī】的新皿中或【huò】者瓶中。

3)细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻【dòng】存【cún】时，弃去培养基【jī】后加【jiā】入【rù】少量胰酶【méi】，细胞变【biàn】圆脱落后，加入【rù】约【yuē】lml含血清的【de】培养基后加入冻存【cún】管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。 

注意事项：
收【shōu】到细胞后【hòu】，若发现【xiàn】干冰【bīng】己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有污【wū】染【rǎn】，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视【shì】为有【yǒu】潜在的生物危害性【xìng】，必须在二级生物【wù】安全【quán】台内操作，并请注意【yì】防护【hù】，所有废液及接触过此细【xì】胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃。

细胞特性：
1)来源：ruxian癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人ruxian癌细胞(Hs578T)运输和保【bǎo】存：使用【yòng】含有胎【tāi】牛【niú】血清【qīng】的2ml冻存管发送存活【huó】细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净操作【zuò】台弃【qì】去上【shàng】清，加入推荐使用的培养【yǎng】基后【hòu】转移至【zhì】l〇cm培养皿或【huò】者T25培养瓶【píng】中培养，传代达【dá】到细胞生长【zhǎng】状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。