人骨肉瘤细胞 （HOS）

人骨肉瘤细胞 (HOS)
细胞介绍：
该细胞是从一名13岁的【de】白人女性的骨肉瘤组【zǔ】织【zhī】中【zhōng】分离【lí】建立的，表现为扁平形态、低饱【bǎo】和密【mì】度、软琼脂中的低克【kè】隆【lóng】形成率和对化【huà】合物及感染的敏感性。

 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 MEM 培养基(MEM:GIBCO);北【běi】美胎牛【niú】血清(United States， GIBCO)，10%，添加NEAA，1%。

2. 培养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在【zài】37°C水浴【yù】中【zhōng】迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟【zhōng】，弃去【qù】上【shàng】清液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培【péi】养【yǎng】过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人骨肉瘤细胞 (HOS)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细【xì】胞【bāo】9-22次。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于【yú】37°C培养【yǎng】箱中【zhōng】消化9-22分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞【bāo】消化情【qíng】况【kuàng】，若细【xì】胞大部 分变圆并脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶【píng】后加少量培养基终止【zhǐ】消化【huà】。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养液【yè】后吹【chuī】匀。将细胞悬【xuán】液【yè】按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新的【de】含8ml培养基的新【xīn】皿中或者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴【tiē】壁细【xì】胞冻存时，弃去培养基后【hòu】加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后【hòu】，加入【rù】约lml含血清的【de】培【péi】养基后 加【jiā】入冻存管中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。

 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰【bīng】己挥发干【gàn】净、冻存【cún】管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立【lì】即【jí】与我们电联。
所有动物细胞均【jun1】视为有【yǒu】潜在的生【shēng】物危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并请注【zhù】意防【fáng】护，所【suǒ】有废液【yè】及接触过此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 
人骨肉瘤细胞 (HOS)细胞特性：
1)来源：骨
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用含有胎牛血清【qīng】的【de】2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离【lí】心【xīn】5min后，于【yú】洁净操作台弃去【qù】上清【qīng】，加入推荐使用的【de】培【péi】养【yǎng】基后转移至l〇cm培养【yǎng】皿或者T25培养【yǎng】瓶中培养，传代【dài】达【dá】到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供使用。