人肝癌细胞（Hep G2）

人肝癌细胞(Hep G2)
细胞介绍：
该细【xì】胞【bāo】系来自15岁男性白人的组织。形态为上皮形，模式【shì】染色体【tǐ】数为55,在免疫【yì】抑制小鼠中不【bú】致瘤。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养基(MEM，GIBCO，添加NaHC031.5g八，丙酮酸【suān】钠O.llg八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培【péi】养【yǎng】条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细【xì】胞【bāo】悬液的【de】冻存管在37°C水浴中【zhōng】迅【xùn】速摇晃解冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基【jī】后【hòu】吹匀。然【rán】后【hòu】将所有细胞悬液【yè】加入培养瓶中培【péi】养过夜（或将细胞【bāo】悬【xuán】液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基【jī】，培养过夜）。第【dì】二天换液并【bìng】检【jiǎn】查细【xì】胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肝癌细胞(Hep G2)对于【yú】贴壁【bì】细胞，传代可参考【kǎo】以下方法：弃去培养上【shàng】清，用不含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞【bāo】9-22次。力口【kǒu】 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于【yú】37°C培养【yǎng】箱中消化9-22分钟，然后在显微镜下观【guān】察【chá】细【xì】胞【bāo】消化情况，若【ruò】细胞【bāo】大【dà】部 分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加少量培养基终止 消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打匀【yún】后吸出，在1000RPM条件下离心4分 钟【zhōng】，弃【qì】去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀【yún】。将细【xì】胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的含8ml培养基的新【xīn】皿中或者【zhě】 瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞【bāo】冻存时，弃【qì】 去培【péi】养基后加入少量【liàng】胰酶，细胞变圆脱【tuō】落【luò】后，加入约lml含【hán】血清【qīng】的【de】培养基后 加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存【cún】。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰己挥【huī】发干净、冻【dòng】存管【guǎn】瓶【píng】盖脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请立即与我们电联【lián】
所【suǒ】有动物细【xì】胞【bāo】均视为有潜在的生物危害性，必须【xū】在二级生物安全台内操【cāo】作【zuò】，并请注意防护【hù】，所有废液【yè】及接触过此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方【fāng】能【néng】丢【diū】弃。
 
人肝癌细胞(Hep G2)细胞特性：
1)来源：肝细胞癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：可选择干冰运输及发送复【fù】苏【sū】存活细【xì】胞方式：（1)干冰运【yùn】输，收到后立即转入液【yè】氮【dàn】冻存或直接【jiē】复苏；（2)存活细胞【bāo】，收到后应继续生长【zhǎng】，传【chuán】代达到【dào】细胞生【shēng】长状态良好时，再进行【háng】冻存。具体【tǐ】操作见细胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。