人子宫内膜腺癌细胞（HEC-1-A）

人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)
细胞介绍：
这【zhè】株【zhū】细胞及其亚株HEC-1-B是H. Kuramoto及其同事1968年【nián】从一位IA期子宫内【nèi】膜【mó】癌【ái】患者身上【shàng】分离得【dé】到的。PAF可以诱导其c-fos的表达。
  
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F-12 培【péi】养【yǎng】基(DMEM/F-12(1:1)，GIBC0、90%;胎牛血清，10%。
2. 培养【yǎng】条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培【péi】养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】迅速放入37°C水浴中（水面要低 于【yú】冻存【cún】管盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的【de】15ml离【lí】心管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟，弃去上清液，加入lmL培【péi】 养基后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液移入含有5ml培【péi】养基的培养瓶【píng】中培养【yǎng】过夜【yè】。 第二天换液【yè】并检查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
  
人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁【měi】离子的【de】PBS润洗【xǐ】细胞9-22次。加【jiā】2m消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-22分钟，然后在【zài】显微镜【jìng】下观察细胞消化【huà】情况，若【ruò】细【xì】胞【bāo】大【dà】部分变圆并脱落【luò】，迅速拿【ná】回【huí】操作台，轻敲几下培养瓶后【hòu】加入3ml此细胞的 培养【yǎng】基终止消化。轻轻吹打后吸出【chū】，移入15ml离心管中，在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟， 弃去【qù】上清液【yè】，加入lmL培养液【yè】后吹匀。移入到事【shì】先准备【bèi】好的含有5ml培养基的【de】T-25培养瓶中或含【hán】有14ml培养 基的T-75培养瓶中【zhōng】培【péi】养。
 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先 要消化处理并进行细胞计【jì】数。消化方法【fǎ】按照细【xì】胞传代方法的9-22步【bù】骤【zhòu】进行【háng】，后的重【chóng】悬液【yè】使用血清【qīng】。悬浮细胞【bāo】直【zhí】接【jiē】计数后离【lí】心，用血清重悬浮，加DMSO至【zhì】终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按【àn】每【měi】lml的数量分【fèn】配【pèi】到冻存管中。本公【gōng】司按每个冻存管【guǎn】细胞数目【mù】大于1X106个细胞冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后【hòu】，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细【xì】胞有污染【rǎn】，请立即【jí】与我【wǒ】们电联。
所有动物细【xì】胞均视【shì】为【wéi】有潜在的生物【wù】危害性，必【bì】须在二级生物安全台内【nèi】操作，并【bìng】请注意防护，所【suǒ】有废液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌后方【fāng】能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：子宫;
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在显微【wēi】镜【jìng】下确认细【xì】胞生【shēng】长【zhǎng】状态，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞【bāo】长满（90%以上）请及【jí】时进行细【xì】胞【bāo】传代，传代培养【yǎng】用6ml本公【gōng】司【sī】附带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检查细胞是否【fǒu】污染【rǎn】，若发现污染或【huò】疑【yí】似污染，请及时【shí】与【yǔ】我们取得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。