人食管癌细胞（Eca-109）

人食管癌细胞(Eca-109)
细胞介绍：
1973年建系，来【lái】自人食管中段鳞【lín】癌组织，小块法原代培养建系【xì】。BALB/c裸鼠移植【zhí】成【chéng】瘤。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPMI-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛血清，10%。
2.培养条【tiáo】件：气相：空【kōng】气，95%;二【èr】氧化【huà】碳【tàn】，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO，现【xiàn】用现配【pèi】。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的冻【dòng】存【cún】管在37°C水浴【yù】中迅速摇【yáo】晃解冻【dòng】，加入4mL培养基混合【hé】均匀。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后【hòu】吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液【yè】加【jiā】入培养【yǎng】瓶中培养过【guò】夜（或将细【xì】胞悬液【yè】加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液【yè】并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人食管癌细胞(Eca-109)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上【shàng】清，用不含钙、镁【měi】离子的PBS润洗细胞9-23次。力口2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中消【xiāo】化【huà】9-23分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大部【bù】 分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻【qīng】敲几【jǐ】下培养瓶后加少【shǎo】量培养基终【zhōng】止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬【xuán】液【yè】按1: 2到1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培养基的【de】新皿中【zhōng】。
细胞冻存【cún】：待细胞【bāo】生长状态良好【hǎo】时【shí】，可进行【háng】细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻【dòng】存时，弃去培养基后加入少量胰酶【méi】，细【xì】胞变圆脱落后，加入约【yuē】lml含血清【qīng】的培养基后 加入【rù】冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现【xiàn】干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有污染，请立即【jí】与我们【men】电联。
所有【yǒu】动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必【bì】须【xū】在二【èr】级【jí】生物安【ān】全台【tái】内操【cāo】作，并【bìng】请注意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃【qì】瓶【píng】中。
 
人食管癌细胞(Eca-109)细胞特性：
1)来源：食管癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存【cún】：使用【yòng】含有胎【tāi】牛血【xuè】清的【de】2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收到细胞后【hòu】， 可在1000RPM，常【cháng】温【wēn】条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净操作台弃【qì】去上【shàng】清，加【jiā】入推荐 使【shǐ】用【yòng】的培养基后转移至【zhì】l〇cm培养皿或者T25培养瓶中【zhōng】培养，传代【dài】达到细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良好时，再进行冻存。具体操作【zuò】见细胞培养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。