人纤维肉瘤细胞（HT-1080）

人纤维肉瘤细胞(HT-1080)
细胞介绍
这株细胞含有活化的N-ras癌基因。
 
细胞特性
1)来源：结缔组织；纤维肉瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微【wēi】镜下确认【rèn】细胞生长状态，去掉封【fēng】口膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培【péi】养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满（90%以【yǐ】上【shàng】）请及时【shí】进行【háng】细胞【bāo】传代，传代培养用6ml本【běn】公【gōng】司附带的*培养基。
5.接到细胞次【cì】日，请【qǐng】检【jiǎn】查细胞是【shì】否污【wū】染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得电【diàn】联。
 
人纤维肉瘤细胞(HT-1080)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM a培养基(MEM a，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管迅速【sù】放入【rù】37°C水浴中（水面要【yào】低于冻【dòng】存管盖【gài】部）摇【yáo】晃解冻，移【yí】入事先【xiān】准备好的【de】含【hán】有4mL培养【yǎng】基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液【yè】移入含有【yǒu】5ml培养基的培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养过夜【yè】。
第【dì】二天换液并检查细胞密度。细胞【bāo】传代【dài】：如果细胞密【mì】度【dù】达80%-90%，即可进行传代培养【yǎng】。对于贴壁细胞，传代可参考【kǎo】以下【xià】方【fāng】法：弃去【qù】培养【yǎng】上【shàng】清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-23次。力口【kǒu】 2m丨消（0.25%Trypsin0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中【zhōng】消化9-23分【fèn】钟，然【rán】后在显微镜下观【guān】察细胞消化情况，若细胞大【dà】部分【fèn】变圆【yuán】并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几【jǐ】下培【péi】养瓶【píng】后加入3ml此【cǐ】细胞的培【péi】养基终止消【xiāo】化。
轻轻吹打后吸出，移入15ml离心【xīn】管中，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃去上清液，加【jiā】入【rù】lmL培养液【yè】后吹匀。移入到事先准备好的含有5ml培养【yǎng】基的T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养基的【de】T-75培养瓶中培养【yǎng】。细胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，先要消化处理并进行细胞【bāo】计数。消化【huà】方法按照细胞传代方法的9-23步骤进行，后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清【qīng】重【chóng】悬【xuán】浮【fú】，加【jiā】DMSO至终【zhōng】浓度为10%。加入【rù】DMSO后迅【xùn】速混匀，按每lml的数量分【fèn】配到【dào】冻【dòng】存管中。本【běn】公【gōng】司按每个冻存管【guǎn】细胞【bāo】数目大【dà】于1X106个细胞【bāo】冻【dòng】存。
 
人纤维肉瘤细胞(HT-1080)注意事项：
收到细胞后【hòu】，若【ruò】发现干【gàn】冰己【jǐ】挥发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落【luò】、破损及【jí】细胞有污染，请立即与我们电联。
所有【yǒu】动物细胞均【jun1】视为有潜在【zài】的生物危害性，必须【xū】在二级生物安全【quán】台内操作【zuò】，并请注【zhù】意防护，所有废液及【jí】接触过【guò】此细胞的【de】器皿【mǐn】需要【yào】灭菌后方能丢弃。