人结肠腺癌细胞 （CW-2）

人结肠腺癌细胞 (CW-2)
细胞介绍：
来源于结肠癌。CEA阳性，移植于裸鼠可成瘤。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,,添加 NaHC031.5g八, D-葡【pú】萄糖【táng】2.5g八【bā】，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。或DMEM 培养基【jī】(GIBCO,添加NaHC031.5g八)，90%;胎牛血清【qīng】， 10%。
2. 培【péi】养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞【bāo】悬【xuán】液的冻存管【guǎn】在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解【jiě】冻，加入4mL培养【yǎng】基混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细【xì】胞悬液加入培养【yǎng】瓶中培养【yǎng】过夜（或将 细胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加入【rù】约8ml培养基，培养【yǎng】过【guò】夜）。第二天换液并检 查【chá】细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结肠腺癌细胞 (CW-2)
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用不含钙、镁离子的【de】PBS润洗细胞9-23次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培【péi】养【yǎng】箱【xiāng】中消【xiāo】化9-23分钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况，若细胞大部【bù】分变圆并脱【tuō】落，迅速【sù】拿回操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养瓶【píng】后【hòu】加少量培养基终止消化。
按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条件下离【lí】心4分 钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的含8ml培养基【jī】的新【xīn】皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生长状态良好【hǎo】时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁【bì】细胞冻存时，弃去培养基后加【jiā】入【rù】少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱落【luò】后，加入约lml含血清的培养基后【hòu】加入冻【dòng】存管【guǎn】中，再添【tiān】加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干【gàn】冰己【jǐ】挥发干净、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损及细【xì】胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均视为有潜【qián】在的生物危害性，必须在【zài】二级生物安全台内操作，并【bìng】请注【zhù】意防护，所有废液及接触【chù】过此【cǐ】细胞的【de】器皿【mǐn】需要灭菌后方【fāng】能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：结肠癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结肠腺癌细胞 (CW-2)运输和保存【cún】：使用【yòng】含有胎牛血清的2ml冻存管发送【sòng】存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后【hòu】，于洁净操作台弃去上【shàng】清，加入推荐使【shǐ】用【yòng】的培养基后转移至l〇cm培【péi】养皿【mǐn】或【huò】者T25培养瓶中培养，传代达到【dào】细胞生长状态【tài】良好时【shí】，再进【jìn】行冻存【cún】。具【jù】体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。