人结肠癌细胞（COLO 205）

人鼻咽癌细胞(CNE2)
细胞介绍：
该CNE2细胞系为低分化鼻咽鳞状细胞癌细胞系。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛
血清，10%。
2. 培【péi】养【yǎng】条【tiáo】件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞【bāo】：将【jiāng】含【hán】有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培【péi】养基【jī】混【hún】合均匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜（或将【jiāng】细胞悬液【yè】加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培【péi】养过夜）。第二天换液并【bìng】检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用【yòng】不【bú】含钙、镁【měi】离子【zǐ】的【de】PBS润洗细胞9-23次【cì】。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于【yú】37°C培养【yǎng】箱中消化【huà】9-23分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情【qíng】况【kuàng】，若细【xì】胞【bāo】大部 分变圆并脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻【qīng】敲几下培【péi】养瓶后加【jiā】少量培养基终止 消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹匀。将【jiāng】细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿【mǐn】中【zhōng】或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行【háng】细【xì】胞冻存。贴壁细【xì】胞冻【dòng】存时，弃【qì】去培养基后加入少量胰【yí】酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清的培养基后加入冻存【cún】管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行【háng】冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请立【lì】即与【yǔ】我们电联【lián】。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜在的生【shēng】物【wù】危害【hài】性，必须在二级生物安全【quán】台【tái】内操作，并请【qǐng】注【zhù】意防护，所有【yǒu】废液及接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用T25瓶充液发送活【huó】细胞。收到细胞后，请先在显微【wēi】镜下检查细胞生长状态，并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜【yè】后，再次检【jiǎn】查细胞状态。若状【zhuàng】态良好，可【kě】进【jìn】行细胞后续【xù】处理【lǐ】操作【zuò】，按【àn】照以下方式【shì】进行。若发现可疑污【wū】染【rǎn】物，请【qǐng】及【jí】时与我们取【qǔ】得电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。