人非小细胞肺腺癌细胞（Na-H157）

人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：多角，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保【bǎo】存【cún】：可【kě】选【xuǎn】择干冰运输及发送复苏存活细【xì】胞方式：（1)干冰运【yùn】输，收到后【hòu】立即【jí】转入液氮【dàn】冻存或直接【jiē】复苏；（2)存活【huó】细胞【bāo】，收到后应继续生长，传代达到【dào】细胞生长状态良好【hǎo】时，再进行冻存【cún】。具体操作见细胞培养步骤。
 
人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备RPIVM-1640培养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO,添加丙酮酸钠O.llg八，10mM Hepes)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管【guǎn】在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解冻【dòng】，加入4mL培养基【jī】混合均【jun1】匀。在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加入培养【yǎng】瓶中培【péi】养过夜【yè】（或【huò】将
细【xì】胞悬【xuán】液【yè】加【jiā】入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜）。第二【èr】天换液并【bìng】检查细胞密度。细胞传代：如果细胞【bāo】密度达80%-90%，即可进行【háng】传【chuán】代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗【xǐ】细胞【bāo】9-23次。力【lì】口 2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养【yǎng】箱中消化9-23分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察细胞【bāo】消化情况【kuàng】，若细胞大部【bù】分【fèn】变圆并脱落【luò】，迅速拿回操作台，轻【qīng】敲几【jǐ】下培养瓶后加少量培养基终【zhōng】止消【xiāo】化【huà】。
按6-8ml/瓶补【bǔ】加培【péi】养基，轻轻打匀【yún】后吸出【chū】，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀。
将【jiāng】细【xì】胞悬液按【àn】1: 2到【dào】1: 5的比例分到【dào】新的含8ml培养基的新【xīn】皿中或【huò】者细胞冻存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后，加入约lml含血清的【de】培养基【jī】后，加入冻【dòng】存【cún】管中【zhōng】，再添加【jiā】1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)注意事项：
收到【dào】细【xì】胞后，若发现【xiàn】干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物【wù】细【xì】胞均视【shì】为有【yǒu】潜在的生【shēng】物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内操作【zuò】，并请注意防护，所有废【fèi】液及接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌【jun1】后方【fāng】能丢弃。