人卵巢癌细胞（CoCl）

人卵巢癌细胞 (CoCl)
细胞介绍：
CoCl细胞建系于1993年【nián】（熊【xióng】世钢等【děng】）。细胞于原代培养至【zhì】第17天*传【chuán】代，以后反复传【chuán】代，生物学特性稳定。可表达多种肿瘤【liú】标志物和野生型P53蛋【dàn】白、突变型P53蛋【dàn】白。裸鼠接【jiē】种产生分化差的腺【xiàn】癌。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培养基(RPIVM-1640:GIBCO,,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄【táo】糖【táng】2.5g八，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄【shè】氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞【bāo】：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】迅速摇晃解冻，加入4mL培【péi】养【yǎng】基【jī】混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然后【hòu】将所有细胞悬液加【jiā】入【rù】培养瓶中培养【yǎng】过夜（或将细胞悬【xuán】液加【jiā】入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培【péi】养【yǎng】基，培养【yǎng】过夜）。第二天换液并检查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人卵巢癌细胞(CoCl)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一【yī】：收【shōu】集细胞【bāo】，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL 培养液后吹匀，将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新【xīn】的含8ml培养基的新皿【mǐn】中或者【zhě】瓶中【zhōng】。
方【fāng】法二：可选择半数换液【yè】方式，弃去半数培养基后【hòu】，将剩余细胞悬起，将细胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 3的比例【lì】分到新的含【hán】8ml培养基的新【xīn】皿中或者瓶【píng】中。
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良好【hǎo】时，可进【jìn】行细【xì】胞冻【dòng】存【cún】。悬浮【fú】细胞冻存时，应【yīng】将细胞【bāo】收集，1000RPM条【tiáo】件下离心4分【fèn】钟，少量保存上清液（防止细胞吸 走)，加入部【bù】分【fèn】新鲜培【péi】养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO 后【hòu】进行【háng】冻存【cún】。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及【jí】细胞有污【wū】染，请立【lì】即与我【wǒ】们电联。
所【suǒ】有动物细【xì】胞均【jun1】视为有【yǒu】潜在【zài】的生物危害性，必须在二级生物安全【quán】台内操作，并请注意防护【hù】，所有废液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器【qì】皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：卵巢癌
2)形态：圆形或椭圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人卵巢癌细胞 (CoCl)运输和保存：可选择干冰运【yùn】输【shū】及发送【sòng】复苏存活细胞方式：（1)干冰运【yùn】输【shū】，收到后立即转入液氮【dàn】冻存或直接复【fù】苏；（2)存活细胞，收到后【hòu】应继续生长，传代达到细胞生长状【zhuàng】态良好【hǎo】时，再进行冻存。具体操作见细【xì】胞【bāo】培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。