人非小细胞肺癌细胞（NCI-H524）

人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)
细胞介绍：
该细胞1982年建系，源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。
 
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或【huò】者lmL冻【dòng】存【cún】管包装运输和保存：可选择干冰【bīng】运输【shū】及发送复苏存【cún】活细【xì】胞【bāo】方式【shì】：（1)干冰运输，收到后【hòu】立【lì】即转入【rù】液氮冻存或直接复苏【sū】；（2)存活【huó】细胞，收到后应【yīng】继续生【shēng】长，传代达到细胞生长状态【tài】良好时，再进行冻存。具体操作见细【xì】胞【bāo】培养步骤。
 
细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度【dù】，培养箱湿【shī】度【dù】为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存【cún】。
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有【yǒu】lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合【hé】均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞【bāo】悬液【yè】加入培养瓶中培养过夜（或将【jiāng】细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入【rù】约8ml培养基，培养【yǎng】过【guò】夜）。第二【èr】天【tiān】换【huàn】液并【bìng】检查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法【fǎ】一：收集细胞【bāo】，1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹匀，将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的【de】比例分到【dào】新的含8ml培养基的新【xīn】皿【mǐn】中或者瓶中。
方法二：可选择【zé】半数【shù】换液方式，弃去半数培养【yǎng】基后，将剩【shèng】余【yú】细【xì】胞悬起，将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 3的比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶【píng】中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良【liáng】好【hǎo】时，可进行【háng】细胞冻存【cún】。悬浮细胞冻存时，应【yīng】将细胞收集，1000RPM条件下离【lí】心4分钟，少量保存上清【qīng】液【yè】（防止细【xì】胞吸走)，加【jiā】入【rù】部分【fèn】新鲜培【péi】养基，加入到冻存管中，在【zài】冻存管中【zhōng】加入10%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
人非小细胞肺癌细胞(NCI-H524)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及【jí】细胞有污染，请立即与我【wǒ】们【men】电联。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作【zuò】，并请注意防护【hù】，所有废液及【jí】接【jiē】触过此【cǐ】细胞【bāo】的【de】器皿需要灭菌后方能丢弃【qì】。