人鼻咽癌细胞（CNE2）

人鼻咽癌细胞(CNE2)
细胞介绍：
该CNE2细胞系为低分化鼻咽鳞状细胞癌细胞系。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎【tāi】牛【niú】
血清，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的冻【dòng】存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解【jiě】冻，加入4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀【yún】。然后将【jiāng】所【suǒ】有细胞悬液加入培【péi】养瓶中培养过夜（或将细【xì】胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养【yǎng】基，培养【yǎng】过夜）。第二天换液并检查【chá】细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上【shàng】清，用【yòng】不含【hán】钙、镁【měi】离子的PBS润洗细【xì】胞9-23次。力【lì】口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消化9-23分钟，然后在显微【wēi】镜下观察细【xì】胞【bāo】消化情况，若细胞大部 分变【biàn】圆并脱落【luò】，迅速拿回操作台，轻敲几下培养【yǎng】瓶【píng】后加少量培【péi】养【yǎng】基【jī】终止 消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养基，轻轻打【dǎ】匀后吸出，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀【yún】。将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的【de】比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴【tiē】壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养基后加入【rù】少量【liàng】胰【yí】酶，细胞变圆脱【tuō】落后，加【jiā】入约lml含血清【qīng】的培养【yǎng】基【jī】后加入冻【dòng】存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰【bīng】己挥发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落、破损【sǔn】及细【xì】胞有污【wū】染，请立即与【yǔ】我们电联。
所有动【dòng】物细胞【bāo】均视为【wéi】有潜【qián】在的【de】生物危害【hài】性，必须在二级生物安全【quán】台内操作，并请【qǐng】注意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的器皿需要【yào】灭菌后方【fāng】能丢弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输【shū】和保【bǎo】存：使用【yòng】T25瓶【píng】充液发送活细胞【bāo】。收到细胞后，请先【xiān】在显微镜下检查细胞生长状态，并将T25瓶置于培【péi】养【yǎng】箱【xiāng】约【yuē】6h或过夜后，再次检查细胞状态。若状态良【liáng】好，可进行细胞后续处理操【cāo】作，按【àn】照以【yǐ】下方【fāng】式进【jìn】行。若发现可疑污染【rǎn】物，请及时与我们取得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。