人鼻咽癌细胞（CNE1）

人鼻咽癌细胞(CNE1)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛【niú】
血清，10%。
2.培【péi】养【yǎng】条件：气【qì】相：空【kōng】气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴【yù】中迅速摇晃解冻，加入4mL培【péi】养基【jī】混合均匀【yún】。在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀【yún】。然【rán】后将所有【yǒu】细胞悬液加入培养【yǎng】瓶中培养过夜（或将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养【yǎng】基【jī】，培养过夜）。第【dì】二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用【yòng】不【bú】含【hán】钙、镁离子的PBS润洗细胞【bāo】9-23次。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-23分钟【zhōng】，然【rán】后在显微镜下观察细胞消化【huà】情【qíng】况，若【ruò】细胞大部 分变圆并【bìng】脱落【luò】，迅速拿回【huí】操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后【hòu】加少量【liàng】培养基终止 消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培【péi】养基，轻轻【qīng】打后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培【péi】养液后【hòu】吹匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新【xīn】的含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
 
3)细胞冻存【cún】：待【dài】细胞生【shēng】长状【zhuàng】态良好时【shí】，可【kě】进行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻【dòng】存【cún】时，弃去培养基【jī】后加入少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含血【xuè】清的【de】培养基后加【jiā】入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干【gàn】冰己【jǐ】挥发干净、冻【dòng】存【cún】管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污染【rǎn】，请【qǐng】立即与我们电联。
所有动物细胞均【jun1】视【shì】为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并【bìng】请【qǐng】注意防护【hù】，所【suǒ】有【yǒu】废【fèi】液及接触过【guò】此细胞的器【qì】皿需要灭菌后方能丢【diū】弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE1)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用T25瓶充【chōng】液发送活细胞【bāo】。收到细【xì】胞后，请先在显微镜下【xià】检查细胞【bāo】生长【zhǎng】状态，并将T25瓶【píng】置于培【péi】养箱约6h或过夜后，再次检查细【xì】胞状态。若状态良好，可进行细【xì】胞后续【xù】处理操作，按照以下方【fāng】式进【jìn】行【háng】。若发现可【kě】疑【yí】污染物【wù】，请及【jí】时与我们取得电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。