人经典小细胞肺癌细胞（NCI-H1688）

人经典小细胞肺癌细胞(NCI-H1688)
细胞介绍：
该细胞来源于一位治疗之前的患者的肝转移灶。
 
细胞特性
1)来源：肺；经典小细胞肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下确认细胞生长状【zhuàng】态【tài】，去掉【diào】封口膜【mó】并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细【xì】胞长满（90%以【yǐ】上）请及时进行细胞【bāo】传代，传代培养【yǎng】用【yòng】6ml本【běn】公【gōng】司附带的*培养基。
5.接到细【xì】胞次日，请检查细胞是【shì】否污染，若【ruò】发现污染或【huò】疑似污【wū】染，请及时与我们取【qǔ】得电联【lián】。细胞用【yòng】途：仅供使用。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血【xuè】清【qīng】，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温【wēn】度：37°C，培养【yǎng】箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

2)细胞处理：

复【fù】苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管【guǎn】迅速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面【miàn】要低【dī】于冻存管盖部）摇【yáo】晃【huǎng】解冻，移入事先【xiān】准备【bèi】好的含有4mL培养基【jī】的15ml离心管【guǎn】中【zhōng】混合均匀【yún】。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，加【jiā】入【rù】lmL培养基后吹【chuī】匀。然后将所有【yǒu】细胞【bāo】悬液移入含【hán】有5ml培养基的培养【yǎng】瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。细胞传代【dài】：如果细胞密度达80%-90%，即可进【jìn】行传代培养。
 
人经典小细胞肺癌细胞(NCI-H1688)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清【qīng】，用不含【hán】钙【gài】、镁离【lí】子的PBS润【rùn】洗细胞【bāo】9-23次。力口【kǒu】 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-23分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部【bù】
分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回【huí】操作【zuò】台，轻敲几下【xià】培养瓶后【hòu】加入3ml此【cǐ】细胞的培养基【jī】终止消化。
轻轻吹打后【hòu】吸【xī】出【chū】，移【yí】入【rù】15ml离心管【guǎn】中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后【hòu】吹匀移【yí】入【rù】到事先准备好的【de】含有5ml培【péi】养基的【de】T-25培养【yǎng】瓶中或含【hán】有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
 
细胞冻存：待细【xì】胞生长状态良好时【shí】，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁【bì】细胞冻存时，先【xiān】要消化处理并进行细胞计数。消【xiāo】化【huà】方【fāng】法按照细胞传代方法的9-23步【bù】骤进【jìn】行，后的重悬【xuán】液使用血【xuè】清。悬浮细胞直【zhí】接计数后离心，用血清重悬浮，加【jiā】DMS至终【zhōng】浓度为10%。加入DMSO后【hòu】迅速混匀，按每lml的数量【liàng】分配到【dào】冻【dòng】存【cún】管【guǎn】中。本公司按【àn】每个冻【dòng】存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
人经典小细胞肺癌细胞(NCI-H1688)注意事项：
收到细【xì】胞【bāo】后，若【ruò】发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视为有【yǒu】潜在【zài】的生物危害【hài】性，必须【xū】在【zài】二级生物安全台内操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所有【yǒu】废液及【jí】接触过此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。