人非小细胞 肺癌细胞（NCI-H1915）

人非小细胞 肺癌细胞(NCI-H1915)
细胞介绍：
该细胞株建于1988年4月，源于一个脑转移病人。
 
细胞特性
1)来源：肺癌，脑转移
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有【yǒu】胎牛血清【qīng】的2ml冻存管发送【sòng】存【cún】活细【xì】胞。收【shōu】到【dào】细胞后，可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁【jié】净操作台弃【qì】去上清，加入推荐使【shǐ】用的【de】培养基【jī】后转移【yí】至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代【dài】达【dá】到细胞生长状【zhuàng】态良好【hǎo】时，再进行冻存【cún】。具体【tǐ】操作见细胞培养步骤。
 
人非小细胞 肺癌细胞(NCI-H1915)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙酮【tóng】酸钠O.llg八)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏【shì】度【dù】，培养湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液【yè】氮储存【cún】。
2)细胞处理：
复【fù】苏细【xì】胞【bāo】：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇【yáo】晃解冻，加【jiā】入4mL培【péi】养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀【yún】。然后【hòu】将所有细胞悬液加入培养【yǎng】瓶中培养过夜（或【huò】将
细胞悬【xuán】液加入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜【yè】）。第二天换液并检【jiǎn】查【chá】细胞【bāo】密度。细胞传代：如果细胞密度达【dá】80%-90%，即【jí】可进【jìn】行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养【yǎng】上清【qīng】，用不含钙、镁【měi】离子的【de】PBS润洗细胞9-23次【cì】。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中【zhōng】，置【zhì】于37°C培养箱中【zhōng】消【xiāo】化9-23分钟【zhōng】，然后在显微镜下观察【chá】细胞消化情【qíng】况【kuàng】，若细胞【bāo】大部分变圆并脱落，迅速拿操作台【tái】，轻敲几下培【péi】养瓶【píng】后【hòu】加少【shǎo】量培养基终止按6-8ml/瓶补加培养基【jī】，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。
将【jiāng】细胞【bāo】悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿【mǐn】中或者瓶中。
 
细胞冻存：待【dài】细【xì】胞生长状态良好【hǎo】时，可进行【háng】细胞冻【dòng】存。贴壁【bì】细胞冻存【cún】时，弃【qì】去培【péi】养基【jī】后加入少量胰酶【méi】，细胞变圆脱落后，加入约lml含【hán】血清的培养基后加入【rù】冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。
 
人非小细胞 肺癌细胞(NCI-H1915)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰己挥发干【gàn】净【jìng】、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损【sǔn】及细胞有污染，请【qǐng】立【lì】即与我们【men】电联。
所有动【dòng】物【wù】细胞【bāo】均视【shì】为有潜在的生物危害【hài】性，必【bì】须在二级生【shēng】物安全台内操作【zuò】，并请注意防【fáng】护，所有废液及【jí】接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方【fāng】能丢弃。