人神经母细胞瘤细胞（SK-N-SH）

人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)
细胞介绍：
SK-N-SH细胞系由j.L.Bieder建系【xì】，它与SK-N-MC所不同【tóng】的是倍增时间较长【zhǎng】且多【duō】巴胺【àn】-(3-羟基酶水平【píng】较高。SK-N-SH在细【xì】胞介导的细胞【bāo】毒性试验中用作【zuò】靶细胞系。
 
细胞特性
1)来源：脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：可选择【zé】干【gàn】冰运输及发送复苏存活细胞【bāo】方式【shì】：（1)干冰运输，收到后【hòu】立即【jí】转入液氮冻存或直接复【fù】苏；（2)存活细胞，收【shōu】到后应继续生长，传【chuán】代达到【dào】细胞生长状【zhuàng】态良好时，再进行冻存【cún】。具体操作见【jiàn】细胞培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养【yǎng】基(MEM,GIBCO,添加NaHC031.5g八，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿【shī】度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速【sù】摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬【xuán】液加入培养瓶中培养过夜（或【huò】将【jiāng】细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基【jī】，培养过【guò】夜）。第【dì】二天换液并检查细胞密度。细胞传代：如【rú】果细【xì】胞密【mì】度【dù】达80%-90%，即可进行传代【dài】培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养【yǎng】上清，用不【bú】含钙、镁离【lí】子的PBS润【rùn】洗细胞9-23次【cì】。力口 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养【yǎng】瓶中，置于37°C培【péi】养箱中消化9-23分钟，然【rán】后在【zài】显微镜下观察细胞消化情【qíng】况【kuàng】，若细胞大部
按6-8ml/瓶【píng】补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条件下【xià】离【lí】心【xīn】4分钟，弃去上清【qīng】液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀。
将【jiāng】细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的含【hán】8ml培【péi】养基的【de】新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细【xì】胞【bāo】生长状态良【liáng】好时，可进【jìn】行细【xì】胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基后加入【rù】少量胰酶【méi】，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后加入冻存管中【zhōng】，再【zài】添加1〇%DMSO后进【jìn】行【háng】冻存。
 
人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰【bīng】己挥【huī】发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱【tuō】落、破损及【jí】细胞有【yǒu】污染【rǎn】，请【qǐng】立即与我们电联。
所有动物细胞均视为有潜在的【de】生物危害【hài】性，必须在二级【jí】生物安全【quán】台内操作，并请注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液【yè】及接【jiē】触过此细胞的器【qì】皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。