人卵巢腺癌细胞（Caov-3）

人卵巢腺癌细胞(Caov-3)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO, ,添加NaHC031.5g八【bā】, D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙【bǐng】酮酸【suān】钠O.llg八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏【shì】度【dù】，培养箱【xiāng】 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养【yǎng】基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬【xuán】液的冻【dòng】存管在37°C水浴中迅速摇晃解【jiě】冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液【yè】加入培养瓶中【zhōng】培养过夜【yè】（或【huò】将细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第【dì】二天换液【yè】并【bìng】检查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人卵巢腺癌细胞(Caov-3)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上清，用不含钙【gài】、镁离子的【de】PBS润洗【xǐ】细胞9-23次【cì】。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-23分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部 分变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操【cāo】作台，轻敲【qiāo】几【jǐ】下【xià】培【péi】养瓶后加少量培养基终止【zhǐ】消化【huà】。按6-8ml/瓶补【bǔ】加【jiā】培养【yǎng】基，轻轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到【dào】新的含8ml培养基的新皿中【zhōng】或【huò】者瓶中。
 
3)细【xì】胞【bāo】冻存：待细胞生长状态【tài】良好时【shí】，可进行细胞【bāo】冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时，弃去【qù】培养基后加入少量胰酶，细【xì】胞变圆脱落【luò】后，加入【rù】约lml含血清的培养基后加【jiā】入冻【dòng】存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发【fā】现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染【rǎn】，请立即与我【wǒ】们电【diàn】联。
所有动物【wù】细胞【bāo】均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须在【zài】二级生物【wù】安全台内操作【zuò】，并请注意防护，所有【yǒu】废液及【jí】接触过此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能【néng】丢弃【qì】。
 
人卵巢腺癌细胞(Caov-3)细胞特性：
1)来源：卵巢
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存【cún】：使用T25瓶充液发送活【huó】细胞。收到细胞后，请先在显微镜下【xià】检【jiǎn】查【chá】细胞生长状态，并将T25瓶置于培养【yǎng】箱约6h或过夜后，再次【cì】检查细胞状态【tài】。若状态良好，可按照以下细【xì】胞培养步【bù】骤进【jìn】行细【xì】胞后续处理操作。若【ruò】发现可【kě】疑污染【rǎn】物，请及时【shí】与我们取得电【diàn】联。
细胞用途：仅供使用。