人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）

人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)
细胞介绍
该【gāi】细胞【bāo】是由Nilsson K实验室于1974年从【cóng】一名37岁的【de】患有恶性组织细胞性淋巴瘤的白人男【nán】性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示【shì】该细胞在人【rén】混合【hé】淋巴细胞培养物上清、佛波酯、VitD3、z-IFN、TNF和【hé】维【wéi】A酸的【de】诱导下【xià】可以向【xiàng】终【zhōng】末【mò】单核细胞分化。该细【xì】胞不合成免疫球蛋白，EBV阴性；可产生溶菌酶、（9-23-微球蛋白，受【shòu】PMA刺激后可产生TNF-ct;表达C3R;可作【zuò】转染【rǎn】宿【xiǔ】主；表【biǎo】达【dá】Fas，对【duì】TNF和抗Fas的抗【kàng】体敏感。
 
细胞特性
1)来源：淋巴瘤
2)形态：单核细胞，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：
使用T25瓶充液【yè】发送活【huó】细胞【bāo】。收【shōu】到细胞后，请先在显微镜下检查细【xì】胞生长状【zhuàng】态，并【bìng】将【jiāng】T25瓶置于【yú】培养箱约【yuē】6h或过夜后【hòu】，再次检查细胞状【zhuàng】态。若状态良好，可按照以下细胞培养步骤【zhòu】进行【háng】细【xì】胞【bāo】后续处理操作。若发现【xiàn】可疑污染【rǎn】物，请及时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添【tiān】加 NaHC031.5g八,
D-葡【pú】萄糖【táng】2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存【cún】。
2)细胞处理：
复苏细胞：
将含有lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培养【yǎng】基混合【hé】均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细【xì】胞【bāo】悬【xuán】液加【jiā】入培养【yǎng】瓶中【zhōng】培【péi】养过夜（或将【jiāng】
细胞悬【xuán】液【yè】加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜【yè】）。第二天【tiān】换液【yè】并检【jiǎn】查细胞密度。细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行【háng】传代培养。
 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀，将【jiāng】细胞悬液按1: 2到1: 5的【de】比例分到【dào】新的含8ml培【péi】养基的新【xīn】皿中或【huò】者瓶中。
方法二：可【kě】选【xuǎn】择半数【shù】换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬【xuán】起，将【jiāng】细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的【de】含8ml培养基的新【xīn】皿【mǐn】中或【huò】者瓶中。
 
细胞冻存【cún】：待细胞生长【zhǎng】状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存。悬【xuán】浮细胞冻存时，应【yīng】将细胞收【shōu】集【jí】，1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，少【shǎo】量保【bǎo】存上清液（防止细胞吸走)，加【jiā】入部分新鲜培【péi】养基，加【jiā】入到冻【dòng】存管中，在冻存【cún】管【guǎn】中加入10%DMSO
后进行冻存。
 
人组织细胞淋巴瘤细胞(U937)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发【fā】现【xiàn】干冰己【jǐ】挥【huī】发干净、冻存管瓶盖脱【tuō】落【luò】、破损及细胞有污【wū】染，请立即与我们电联。
所有动【dòng】物细【xì】胞均视为【wéi】有潜在的【de】生【shēng】物危害性，必【bì】须在二级生【shēng】物安全台内操作，并【bìng】请注意防护，所有废液【yè】及接触过此细【xì】胞的器皿需要【yào】灭菌后方能丢弃。