人胃腺癌细胞（BGC-823）

人胃腺癌细胞(BGC-823)
细胞介绍：
建自一位62岁的胃癌患者。
  
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气【qì】相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37°C，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬【xuán】液的冻存管迅【xùn】速放入37°C水浴中（水面要低 于【yú】冻存管盖部【bù】）摇【yáo】晃解冻【dòng】，移入事先准备【bèi】好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基【jī】后吹【chuī】匀。然【rán】后将所【suǒ】有细胞悬液移【yí】入含有5ml培养基的培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养过夜。第二天换液并检【jiǎn】查细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃腺癌细胞(BGC-823)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不【bú】含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细【xì】胞9-23次。力【lì】口2m丨【shù】消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养【yǎng】箱中消【xiāo】化9-23分钟，然后在显【xiǎn】微镜下【xià】观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大部 分【fèn】变圆并【bìng】脱落，迅速拿【ná】回操作台【tái】，轻【qīng】敲几下培养瓶后【hòu】加入3ml此细胞的 培养基终【zhōng】止消化。轻轻吹打后【hòu】吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去【qù】上清液，加【jiā】入lmL培养液后【hòu】吹匀【yún】。移入【rù】到事【shì】先【xiān】准备【bèi】好的含【hán】有5ml培养【yǎng】基的T-25培养瓶【píng】中或含有14ml培养基的【de】T-75培养瓶中培养。
 
细胞冻存：待细胞【bāo】生长状态良好时，可【kě】进行【háng】细胞冻存。贴【tiē】壁【bì】细胞冻存时，先要【yào】消【xiāo】化【huà】处理并进行细胞计数。消化方【fāng】法按照细胞传代方【fāng】法的9-23步骤进行，后的重【chóng】悬液使用血清。悬浮细【xì】胞直【zhí】接计数后离心，用血清重悬浮【fú】，加DMSO至终浓度为10%。加入【rù】DMSO后【hòu】迅速混【hún】匀【yún】，按每lml的数量分配到【dào】冻存管中。本公【gōng】司按每【měi】个冻存管细【xì】胞数目【mù】大于1X106个细胞冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱【tuō】落、破【pò】损及【jí】细【xì】胞有污染，请立【lì】即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞【bāo】均【jun1】视为有潜【qián】在的【de】生物危害性，必须在二级生物【wù】安全台内操作，并请注意防护【hù】，所【suǒ】有废液【yè】及接触过此细胞的【de】器【qì】皿需要灭【miè】菌后方能丢弃。
  
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃腺癌细胞(BGC-823)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在显【xiǎn】微镜下确【què】认细胞生长状态，去掉封口膜【mó】并将T25瓶置于【yú】37°C培养约【yuē】2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细【xì】胞【bāo】长【zhǎng】满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞传【chuán】代【dài】，传代培养【yǎng】用6ml本公司附带的【de】*培养基。
5.接【jiē】到细【xì】胞次日，请检查细胞【bāo】是否污染，若【ruò】发现污染或【huò】疑似污染，请及时【shí】与我【wǒ】们取得电联。
细胞用途：仅供使用。