人甲状腺鳞癌细胞（SW579）

人甲状腺鳞癌细胞(SW579)
细胞介绍：
在裸鼠中成瘤(产生三级恶性纺锤状巨细胞瘤)。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.L-15培养基【jī】(GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。培养条件: 气相：空气，100%。温【wēn】度：37摄氏度。
2.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然【rán】后将所有细胞悬液【yè】加入【rù】培【péi】养【yǎng】瓶中培养过【guò】夜【yè】（或【huò】将细胞悬液【yè】加入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二【èr】天【tiān】换液并检查细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人甲状腺鳞癌细胞(SW579)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不【bú】含钙、镁【měi】离子的PBS润洗细【xì】胞9-21次【cì】。力【lì】口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶【píng】中，置【zhì】于37°C培养箱【xiāng】中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况【kuàng】，若细胞大部分变圆并脱落【luò】，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养【yǎng】基【jī】终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹匀。将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的【de】比【bǐ】例分到新的含8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时【shí】，可【kě】进行细胞冻存。贴壁【bì】细【xì】胞冻存时，弃去【qù】培养基后加【jiā】入少量胰酶，细【xì】胞变圆脱【tuō】落后，加入约lml含血清的培养基【jī】后加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
 
注意事项：
收到【dào】细【xì】胞后，若发现干冰【bīng】己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们【men】电【diàn】联【lián】。
所有动物细胞均【jun1】视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须【xū】在二级生物【wù】安【ān】全台内操作，并【bìng】请注意【yì】防护【hù】，所有废液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：甲状腺
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人甲状腺鳞癌细胞(SW579)运输和保存：使【shǐ】用含有胎牛血清的2ml冻存管发【fā】送存活细胞。收到细胞后【hòu】，可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心5min后【hòu】，于洁净【jìng】操作台【tái】弃去上清，加入【rù】推【tuī】荐使用的培养基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T75培养瓶【píng】中培养，传代达到细【xì】胞生长【zhǎng】状态【tài】良【liáng】好时，再【zài】进行冻存。具体操作【zuò】见【jiàn】细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。