人结直肠腺癌细胞（SW-480）

人结直肠腺癌细胞(SW-480)
细胞介绍：
该细胞来源于一个50岁的男性结肠癌患者。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备L-15培养【yǎng】基(GIBCO)，90%;北美【měi】胎【tāi】牛血【xuè】清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气相：空气，100%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
 复苏细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管迅速放入【rù】37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入【rù】事先【xiān】准【zhǔn】备好的【de】含有4mL培养基的15ml离心管【guǎn】中混合均【jun1】匀。在1000RPM条【tiáo】件下离【lí】心4分钟，弃去上【shàng】清液，加入【rù】lmL培 养基后吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬【xuán】液移入含有5ml培【péi】养基的【de】培【péi】养瓶中培养【yǎng】过夜【yè】。 第二天换液【yè】并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结直肠腺癌细胞(SW-480)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上【shàng】清【qīng】，用【yòng】不【bú】含钙【gài】、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后【hòu】在显【xiǎn】微镜【jìng】下观察【chá】细胞消化情况，若细胞大部分变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回【huí】操作台，轻敲【qiāo】几下培养瓶【píng】后加入2ml细胞【bāo】*培【péi】养基终止【zhǐ】消化。轻轻吹打后吸【xī】出，移【yí】入【rù】15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，加入【rù】lmL培养【yǎng】液【yè】后吹匀。移入到事【shì】先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中【zhōng】培养。
 
细【xì】胞冻存：待【dài】细胞【bāo】生长状态良好【hǎo】时，可【kě】进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先【xiān】要消化【huà】处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的9-21步【bù】骤【zhòu】进【jìn】行，后的重悬液使用血清。加DMSO至终浓度【dù】为10%。加【jiā】入DMSO后迅速混 匀，按每lml的【de】数量分配到冻存管中。本公【gōng】司按每个冻存管细胞数目大【dà】于【yú】1X106个【gè】细【xì】胞【bāo】冻【dòng】存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶【píng】盖脱落、破损【sǔn】及【jí】细【xì】胞有污染，请立即与我【wǒ】们电联。
所【suǒ】有动物【wù】细胞均视为有潜【qián】在的生物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接【jiē】触过【guò】此细胞的器皿【mǐn】需要灭【miè】菌后方【fāng】能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：结直肠癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结直肠腺癌细胞(SW-480)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜【jìng】下确认细胞生长状【zhuàng】态，去掉封口膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培【péi】养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长【zhǎng】满（80%-90%)请及时进行细胞传代，传代培养用【yòng】6ml本公【gōng】司【sī】附带的*培养【yǎng】基。
5.接到细【xì】胞次【cì】日，请检查细胞是否【fǒu】污染【rǎn】，若发【fā】现【xiàn】污染或疑【yí】似污染【rǎn】，请及时与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。